细胞共培养法诱导兔脂肪来源干细胞向软骨细胞分化的实验研究

发布时间：2017-09-20 04:20

  本文关键词：细胞共培养法诱导兔脂肪来源干细胞向软骨细胞分化的实验研究

  更多相关文章： 脂肪来源干细胞 软骨细胞 共培养 诱导分化 兔

【摘要】：目的利用软骨细胞与脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)共培养,观察ADSCs是否能向软骨细胞定向分化。方法 4月龄健康新西兰大白兔8只,雌雄不限,体重2.2～2.7 kg,分离、培养兔软骨细胞和ADSCs,取第2代细胞用于实验。将实验分为两组,实验组各取将1 mL细胞密度为2×104个/mL的软骨细胞和ADSCs分别接种至Transwell小室6孔板上、下层共同培养,对照组单独培养ADSCs。倒置相差显微镜观察两组ADSCs形态变化;培养14 d后行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,实时荧光定量PCR检测两组ADSCsⅡ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA表达。结果倒置相差显微镜观察示,随培养时间延长,实验组ADSCs逐渐变为软骨样细胞形态,呈圆形;对照组ADSCs仍以梭形为主,呈束状或漩涡状生长。培养14 d,实验组甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均为阳性;对照组均为阴性;实时荧光定量PCR检测示,实验组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA相对表达量分别为1.43±0.07、2.13±0.08、1.08±0.08,显著高于对照组(0.04±0.03、0.13±0.04、0.10±0.02),差异均有统计学意义(P0.05)。结论通过与软骨细胞共同培养,ADSCs可定向分化为软骨细胞。
【作者单位】： 天津医院脊柱外科;天津医院骨科研究所细胞工程室;天津理工大学机械工程学院;
【关键词】： 脂肪来源干细胞 软骨细胞 共培养 诱导分化 兔
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31000432、11172208) 天津市卫生局科技基金重点资助项目(2010KR08) 中国博士后科学基金资助项目(2011M500530、2012T50235)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 软骨损伤是临床常见疾病之一,由于软骨是一种无神经和血管营养的组织,自身修复能力很差[1]。目前常用的修复方法有微骨折术、自体或同种异体组织移植等,但存在诸多问题,效果不理想[2]。软骨组织工程为解决这一难题提供了新方法,由于脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells，

本文编号：885870