mTOR在STZ诱导的糖尿病大鼠认知功能障碍中的作用研究

  本文关键词：mTOR在STZ诱导的糖尿病大鼠认知功能障碍中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

《中南大学》 2012年

mTOR在STZ诱导的糖尿病大鼠认知功能障碍中的作用研究

方妮  

【摘要】：目的： 研究链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导的糖尿病大鼠海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR,包括p-mTOR和t-mTOR)的变化与其糖尿病病程、糖尿病认知功能障碍及凋亡相关蛋白的相关性。 方法： 将雄性SD大鼠随机分成糖尿病组(DM组)和正常对照组(Con组),适应性喂养一周后,DM组大鼠腹腔注射STZ(60mg/kg),3天后检测尾静脉随机血糖16.7mmol/1者,视为造模成功(n=27)；对照组大鼠(n=21)腹腔注射等量柠檬酸缓冲液。建模成功后将两组大鼠分别喂养11周、15周和20周,每周次大鼠数量均相等。当喂养到所需的周次时,正常组和糖尿病组大鼠各取5只,先行Morris水迷宫实验检测认知功能,再采血检测血糖和血脂,取新鲜海马组织液氮冻存,用于提取组织蛋白行p-mTOR、t-mTOR、Bax、Bcl-2的Western bloting检测,其余的大鼠用4%多聚甲醛灌注后取脑,石蜡切片行海马组织的免疫组化染色,并用tunel法检测海马组织细胞凋亡情况。 结果： 1. Morris水迷宫实验表明,与正常对照组比较,成模后11周,糖尿病组大鼠的逃避潜伏期和原平台所在象限停留的时间差异均无统计学意义(P0.05)；成模后15及20周,糖尿病组大鼠逃避潜伏期和原平台所在象限停留的时间差异有统计学意义(P0.05),逃避潜伏期较正常组延长,原平台所在象限停留的时间较正常组减少。在3组糖尿病大鼠中,随病程延长,逃避潜伏期逐渐延长(P0.05)、原平台所在象限停留的时间差异无统计学意义(P0.05)。 2. tunel法检测结果显示,成模后20周,糖尿病组大鼠海马CA1区锥体细胞出现明显凋亡,阳性神经元的细胞核呈棕黄色,核固缩深染,正常组神经元胞核无棕黄着色。 3.与正常对照组比较,成模后11周,糖尿病大鼠海马组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Bax/Bcl-2比值的差异无统计学意义(P0.05),成模后15及20周,糖尿病大鼠海马组织Bcl表达无明显变化,Bax的表达及Bax/Bcl-2比值明显增加(P0.05),且随病程延长呈逐渐加重趋势。 4.海马组织免疫组化结果显示,与同周次正常对照组比较,成模后11周,糖尿病大鼠海马CA1区t-mTOR表达无明显变化,锥体细胞胞浆无明显着色,成模后15周,t-mTOR表达增加,胞浆着棕黄色,细颗粒状,成模后20周,t-mTOR表达明显增加,胞浆着棕黄色,粗颗粒状。 5.与正常对照组比较,成模后11周,糖尿病组大鼠海马组织p-mTOR和t-mTOR勺表达差异无统计学意义(P0.05)；成模后15及20周,糖尿病组大鼠海马组织p-mTOR和t-mTOR的表达增加,且随病程延长逐渐增加,差异均有统计学意义(P均0.05)。 结论： 1.STZ诱导的糖尿病大鼠认知功能障碍随病程延长逐渐加重。 2.STZ诱导的糖尿病大鼠海马组织凋亡随病程延长逐渐增加。 3.STZ诱导的糖尿病大鼠海马组织t-mTOR免疫组化阳性细胞表达、p-mTOR(Ser2448)及t-mTOR蛋白表达随病程延长逐渐增加。

【关键词】：
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R587.1;R749.2
【目录】：

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