SCF/c-Kit信号通路在抑郁症致病机理中的作用
发布时间：2023-03-26 23:56
干细胞因子(stem cell factor, SCF)结合受体酪氨酸激酶c-Kit后,可转导多条信号通路。它们介导细胞增殖、存活、分化、迁移、黏附和化学趋向等一系列生物过程。庞大数目的突变动物模型及其相关研究表明SCF/c-Kit对黑色素细胞生成、造血作用、配子发生、以及肥大细胞和Cajal细胞的发育是至关重要的。虽然早在一百年前就建立了第一个c-Kit突变小鼠品系,直到今天关于c-Kit分子和生理功能的报道仍在快速增长。 在本论文中,通过ENU化学诱变,我们得到并鉴定了一个原癌基因c-Kit新的点突变小鼠品系:c-KitV922G突变小鼠,在c-Kit激酶区发生V922G错义突变。大体上讲,该品系杂合突变小鼠表现为色素沉积缺陷、盲肠增大,且外周血淋巴细胞数和肥大细胞数有减少的趋势,纯合突变小鼠胚胎期致死。 我们还鉴定了一个转录因子Pax3基因上的新的点突变小鼠品系:Splotch3646突变小鼠,在Pax3基因的第6号外显子上有一个错义突变A894G,造成同源结构域HD的N272D突变,同时还发现在第7号外显子上有一个同义突变C1154T。该品系杂合突变小鼠表...
【文章页数】：126 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
文中常用缩写列表
第一章 研究背景介绍
第一节 乙酰基亚硝基脲
1.1.1 ENU 诱变原理
1.1.2 诱变及筛查手段
1.1.3 突变基因的定位及克隆
第二节 Stem cell factor (SCF) / c-Kit 信号通路
1.2.1 W 和Sl 基因座
1.2.1.1 W 基因座(W/c-kit locus)
1.2.1.2 Steel 基因座(Stem cell factor, steel still underway)
1.2.2 SCF/c-Kit 信号转导
1.2.2.1 SCF 和c-Kit 的结构及特征
1.2.2.2 通过 c-Kit 的信号转导
第三节 c-Kit 相关突变的人类疾病及动物模型
1.3.1 功能缺失型突变
1.3.2 功能获得性突变
1.3.3 c-Kit的不适当表达
第四节 人类的隐形杀手——抑郁症
1.4.1 抑郁症概述
1.4.2 抑郁症类型
1.4.3 抑郁症的症状
1.4.4 抑郁症对人们生活的影响
1.4.5 抑郁症成因
1.4.5.1 概述
1.4.5.2 抑郁症产生的生物因素
第五节 关联分析
1.5.1 人类基因组标记和遗传图谱
1.5.2 单核苷酸多态性标记简介
1.5.2.1 SNP 概述
1.5.2.2 SNP 的应用
1.5.3 关联分析
1.5.3.1 Case-Control分析
1.5.3.2 传递不平衡检验
参考文献
第二章 两种白斑小鼠突变基因的染色体定位
第一节 引言
第二节 材料与方法
2.2.1 实验动物与设施
2.2.2 组织学分析
2.2.3 外周血常规分析
2.2.4 突变位点定位及克隆
第三节 实验结果
2.3.1 G1M1007品系小鼠表型
2.3.2 G1M1007小鼠突变位点位于W/c-Kit基因
2.3.3 解剖分析c-KitV922G/+杂合突变小鼠表型缺陷
2.3.4 睾丸和脾脏未发现异常
2.3.5 G1M3646 品系小鼠表型
2.3.6 G1M3646 小鼠突变位点位于Pax3 基因
第四节 讨论
参考文献
第三章 SCF/c-Kit 信号与抑郁症
第一节 引言
第二节 材料与方法
3.2.1 实验动物与设施
3.2.2 海马蛋白提取及检测
3.2.3 单胺类神经递质检测
3.2.4 血清及血浆的制备
3.2.5 外周血激素水平检测
3.2.6 小鼠行为学实验
3.2.6.1 开放场实验
3.2.6.2 明暗箱穿梭
3.2.6.3 高架十字迷宫
3.2.6.4 强迫游泳
3.2.6.5 悬尾实验
3.2.7 脑组织冰冻切片
3.2.8 免疫荧光
第三节 实验结果
3.3.1 c-KitV922G突变体外表达量下降
3.3.2 c-KitV922G/+杂合子小鼠海马区c-Kit 蛋白表达量及磷酸化水平下降
3.3.3 c-KitV922G/+杂合子小鼠有类似抑郁症(depression-like)行为表型
3.3.4 生理指标测定
3.3.5 c-KitV922G/+杂合子成年小鼠海马齿状回 SGZ 区可见新生神经元增殖与分化的推迟
第四节 讨论
参考文献
第四章 c-Kit 与DISC1 基因上的单核苷酸多态性位点与抑郁症的关联分析
第一节 引言
第二节 材料与方法
4.2.1 研究对象
4.2.2 实验方法
4.2.2.1 DNA 提取
4.2.2.2 测序反应
4.2.2.3 Taqman分型技术
4.2.2.4 荧光素酶报告基因系统
4.2.2.5 引物设计
4.2.2.6 数据分析
第三节 实验结果
4.3.1 c-Kit 与抑郁症的关联分析
4.3.2 DISC1 基因与双向情感障碍的关联分析
第四节 讨论
4.4.1 人类的W/c-Kit 基因座与抑郁症相关联
4.4.2 DISC1 基因与双向情感障碍的关联分析
4.4.3 c-Kit 与DISC1 之间可能存在一定的联系
参考文献
第五章 总结与展望
参考文献
结语
致谢
附录一 外周血激素水平检测方法
附录二 攻读博士期间论文情况
本文编号：3771954
【文章页数】：126 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
文中常用缩写列表
第一章 研究背景介绍
第一节 乙酰基亚硝基脲
1.1.1 ENU 诱变原理
1.1.2 诱变及筛查手段
1.1.3 突变基因的定位及克隆
第二节 Stem cell factor (SCF) / c-Kit 信号通路
1.2.1 W 和Sl 基因座
1.2.1.1 W 基因座(W/c-kit locus)
1.2.1.2 Steel 基因座(Stem cell factor, steel still underway)
1.2.2 SCF/c-Kit 信号转导
1.2.2.1 SCF 和c-Kit 的结构及特征
1.2.2.2 通过 c-Kit 的信号转导
第三节 c-Kit 相关突变的人类疾病及动物模型
1.3.1 功能缺失型突变
1.3.2 功能获得性突变
1.3.3 c-Kit的不适当表达
第四节 人类的隐形杀手——抑郁症
1.4.1 抑郁症概述
1.4.2 抑郁症类型
1.4.3 抑郁症的症状
1.4.4 抑郁症对人们生活的影响
1.4.5 抑郁症成因
1.4.5.1 概述
1.4.5.2 抑郁症产生的生物因素
第五节 关联分析
1.5.1 人类基因组标记和遗传图谱
1.5.2 单核苷酸多态性标记简介
1.5.2.1 SNP 概述
1.5.2.2 SNP 的应用
1.5.3 关联分析
1.5.3.1 Case-Control分析
1.5.3.2 传递不平衡检验
参考文献
第二章 两种白斑小鼠突变基因的染色体定位
第一节 引言
第二节 材料与方法
2.2.1 实验动物与设施
2.2.2 组织学分析
2.2.3 外周血常规分析
2.2.4 突变位点定位及克隆
第三节 实验结果
2.3.1 G1M1007品系小鼠表型
2.3.2 G1M1007小鼠突变位点位于W/c-Kit基因
2.3.3 解剖分析c-KitV922G/+杂合突变小鼠表型缺陷
2.3.4 睾丸和脾脏未发现异常
2.3.5 G1M3646 品系小鼠表型
2.3.6 G1M3646 小鼠突变位点位于Pax3 基因
第四节 讨论
参考文献
第三章 SCF/c-Kit 信号与抑郁症
第一节 引言
第二节 材料与方法
3.2.1 实验动物与设施
3.2.2 海马蛋白提取及检测
3.2.3 单胺类神经递质检测
3.2.4 血清及血浆的制备
3.2.5 外周血激素水平检测
3.2.6 小鼠行为学实验
3.2.6.1 开放场实验
3.2.6.2 明暗箱穿梭
3.2.6.3 高架十字迷宫
3.2.6.4 强迫游泳
3.2.6.5 悬尾实验
3.2.7 脑组织冰冻切片
3.2.8 免疫荧光
第三节 实验结果
3.3.1 c-KitV922G突变体外表达量下降
3.3.2 c-KitV922G/+杂合子小鼠海马区c-Kit 蛋白表达量及磷酸化水平下降
3.3.3 c-KitV922G/+杂合子小鼠有类似抑郁症(depression-like)行为表型
3.3.4 生理指标测定
3.3.5 c-KitV922G/+杂合子成年小鼠海马齿状回 SGZ 区可见新生神经元增殖与分化的推迟
第四节 讨论
参考文献
第四章 c-Kit 与DISC1 基因上的单核苷酸多态性位点与抑郁症的关联分析
第一节 引言
第二节 材料与方法
4.2.1 研究对象
4.2.2 实验方法
4.2.2.1 DNA 提取
4.2.2.2 测序反应
4.2.2.3 Taqman分型技术
4.2.2.4 荧光素酶报告基因系统
4.2.2.5 引物设计
4.2.2.6 数据分析
第三节 实验结果
4.3.1 c-Kit 与抑郁症的关联分析
4.3.2 DISC1 基因与双向情感障碍的关联分析
第四节 讨论
4.4.1 人类的W/c-Kit 基因座与抑郁症相关联
4.4.2 DISC1 基因与双向情感障碍的关联分析
4.4.3 c-Kit 与DISC1 之间可能存在一定的联系
参考文献
第五章 总结与展望
参考文献
结语
致谢
附录一 外周血激素水平检测方法
附录二 攻读博士期间论文情况
本文编号：3771954
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jsb/3771954.html
