Curcumin对阿尔茨海默病中APP的淀粉样酶切途径的调控作用
发布时间:2023-04-27 23:36
目的:研究发现Curcumin可以明显抑制Aβ的产生,具有防治阿尔茨海默病的作用,但其机制仍不明确。在淀粉样酶切途径中,APP经β-和γ-分泌酶作用产生Aβ。本课题旨在通过研究Curcumin作用于阿尔茨海默病中APP淀粉样酶切途径的环节,探讨其抑制Aβ产生的作用机制,为AD治疗的新途径提供重要实验依据。 方法:体外培养神经系细胞SHSY5Y和非神经系细胞HEK293,以LipofectaminTM2000脂质体介导瞬时共转染pBACE1-mychis和pAPPswe两种质粒,Curcumin分浓度梯度(0、1.25、5、20μmol/L)处理转染后的SHSY5Y和HEK293 24h,以及5μmol/LCurcumin按时间梯度(0、12、24、48h)分别处理转染后的SHSY5Y和HEK293,然后通过RT-PCR检测APP和BACE1 mRNA水平,Western blot检测BACE1和C99蛋白表达情况,ELISA检测Aβ40/42水平。 结果:RT-PCR显示,经Curcumin处理后在两种细胞系中APP和BACE1 mRNA表达水平都有明显减弱,呈浓度-时间依赖性(P&l...
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料和仪器
1.1 材料
1.2 实验仪器和设备
2 实验方法
2.1 细胞培养
2.2 质粒扩增和提取
2.3 转染和 Curcumin 处理细胞
2.4 RT-PCR 检测 APP 和 BACE1mRNA 的表达
2.5 Western blot 方法检测 BACE1 和 C99 表达
2.6 ELISA 方法检测表达 Aβ40/Aβ42 的表达
3 结果
3.1 RT-PCR 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 APP mRNA 表达情况
3.2 RT-PCR 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 BACE1 mRNA 表达情况
3.3 Western blot 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 BACE1 蛋白表达情况
3.4 Western blot 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 C99 蛋白表达情况
3.5 ELISA 方法检测表达 Aβ40/Aβ42 的表达
4 讨论
参考文献
综述文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录
本文编号:3803293
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1 材料和仪器
1.1 材料
1.2 实验仪器和设备
2 实验方法
2.1 细胞培养
2.2 质粒扩增和提取
2.3 转染和 Curcumin 处理细胞
2.4 RT-PCR 检测 APP 和 BACE1mRNA 的表达
2.5 Western blot 方法检测 BACE1 和 C99 表达
2.6 ELISA 方法检测表达 Aβ40/Aβ42 的表达
3 结果
3.1 RT-PCR 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 APP mRNA 表达情况
3.2 RT-PCR 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 BACE1 mRNA 表达情况
3.3 Western blot 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 BACE1 蛋白表达情况
3.4 Western blot 检测 Curcumin 对转染后 HEK293 和 SHSY5Y 细胞 C99 蛋白表达情况
3.5 ELISA 方法检测表达 Aβ40/Aβ42 的表达
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