冈田酸诱导细胞实验性阿尔茨海默病发生中PTEN的变化

发布时间：2023-05-20 12:35

　　目的:以细胞形态改变和tau蛋白过度磷酸化为反映AD(Alzheimer’s Disease)发生发展的关键指标,初步探明实验性AD诱导产生过程中的PTEN变化状况及其与tau蛋白过度磷酸化的关系,以深化理解AD的发病机制。 方法:①采用冈田酸(Okadaic acid,OA)诱导SH-SY5Y细胞和NG108-15细胞,以细胞形态改变和tau蛋白过度磷酸化为观察指标,建立用于AD研究的细胞模型。②倒置显微镜观察细胞形态的变化。③Western blot法测定SH-SY5Y细胞和NG108-15细胞Ser396位点磷酸化tau蛋白水平和PTEN蛋白水平。④RT-PCR方法观测SH-SY5Y细胞PTEN mRNA水平。 结果:1.冈田酸诱导SH-SY5Y细胞AD样发生发展中PTEN的变化:①OA孵育SH-SY5Y细胞可显著改变细胞的形态,随OA孵育时间的延长,6 h后细胞开始变圆,突触缩回,18 h后细胞大部分变圆,突触消失,48 h后细胞漂浮生长,部分细胞呈死亡状态;40 nmol/L OA作用于细胞,Ser396位点磷酸化tau蛋白水平在OA孵育后12 h显著升高, 18 h、24 ...

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前言
第一部分 冈田酸诱导 SH-SY5Y 细胞 AD 样发生发展中 PTEN 的变化
    材料和方法
    结果
        1 OA 对 SH-SY5Y 细胞形态的影响
        2 OA 对 SH-SY5Y 细胞tau 蛋白磷酸化水平的影响
        3 OA 诱导 SH-SY5Y 细胞tau 蛋白过度磷酸化中 PTEN 蛋白水平的变化
        4 OA 诱导 SH-SY5Y 细胞产生 AD 样过程中 PTEN mRNA 水平的变化
    讨论
    小结
第二部分 冈田酸诱导 NG108-15 细胞 AD 样发生发展中 PTEN 的变化
    材料与方法
    结果
        1 OA 对 NG108-15 细胞形态的影响
        2 OA 对 NG108-15 细胞tau 蛋白磷酸化水平的影响
        3 OA 诱导 NG108-15 细胞tau 蛋白过度磷酸化中 PTEN 蛋白水平的变化
    讨论
    小结
结论
参考文献
附录
致谢
综述



本文编号：3821124