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Aβ对c-Fos和SUMO-1在海马表达的影响

发布时间:2023-11-09 19:46
  阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是以智能衰退为主要表现的神经系统退行性疾病。AD的主要病理特征为脑内分布有由大量的β-淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)沉积形成的老年斑(senile plaque, SP)、神经元内高度磷酸化tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangle)、神经元营养障碍、神经元的大量丢失、突触的损害和丢失。目前AD的病因尚不清楚,但Aβ神经毒性被认为是各种因素引起AD的共同通路。本实验分别在AD转基因鼠和在脑内注入Aβ的SD大鼠动物模型上探讨Aβ对c-Fos和小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifer, sumo-1)在海马内表达的影响。主要研究结果如下: 第一部分:Aβ诱导c-Fos的表达: 1.免疫组织化学检测显示12月龄APPswe/PS1ΔE9 AD转基因鼠脑内有大量的β-淀粉样蛋白沉积形成的斑块。同12月龄野生型小鼠相比,Fos蛋白表达显著增加,Fos免疫阳性染色主要分布在海马CA1-4区的锥体细胞层、齿状回、丘脑、下丘脑等部位的神经元胞核内。 2.SD...

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
    材料
        1.实验动物
        2.主要药品及试剂
        3.主要仪器
        4.有关溶液的配制
    方法
        1.动物冷水应激模型制备
        2.大鼠海马注入不同肽段的Aβ
        3.大鼠侧脑室内注入Aβ1-40
  •         4.冰冻脑组织切片制备
            5.免疫组织化学染色
            6.脑组织切片免疫荧光染色
            7.鼠脑组织SUMO-1蛋白的提取
            8.考马斯亮蓝法蛋白定量
            9.Western Blot免疫印迹
            10.Aβ1-40异聚体的制备
            11.Aβ1-40与脑组织匀浆孵育制备淀粉样蛋白的异聚体吸光度测定
            12.积分光密度分析
            13.统计分析
    实验结果
        第一部分:SD大鼠脑内注入Aβ片段后,Fos蛋白的表达
            一) APPswe/PS1ΔE9转基因鼠脑内Fos蛋白表达增加
                1.1 APPswe/PS1ΔE9转基因鼠脑内Aβ及老年斑的表达明显增多
                1.2 在APPswe/PS1ΔE9转基因鼠脑内Fos表达明显高于对照的野生型鼠
            二) SD大鼠海马内注入Aβ片段后,Fos蛋白表达改变情况
                2.1 SD大鼠海马内注入Aβ1-40片断不同时程后Fos表达改变情况
                2.2 SD大鼠海马内注入不同浓度的Aβ1-40后Fos表达改变情况
                2.3 SD大鼠海马内注入不同肽段长度的Aβ后,Fos表达改变情况
                2.4 SD大鼠侧脑室内注入Aβ1-40后Fos表达改变情况
                2.5 Fos表达阳性的神经元定性研究
        第二部分 Aβ对SUMO-1表达影响的研究
            一) 转基因鼠脑内SUMO-1的分布表达情况
                1.1 APPswe/PS1ΔE9转基因鼠脑内SUMO-1蛋白的表达
                1.2 APPswe/PS1ΔE9转基因鼠脑内SUMO-1与Aβ的定位
            二) SD大鼠海马内注入Aβ肽段后SUMO-1表达情况
                2.1 SD大鼠海马内注入单体Aβ1-40后SUMO-1的表达
                2.2 SD大鼠海马内注入纤维状Aβ1-40后SUMO-1的表达
            三) 昆明鼠冷水应激后SUMO-1的表达
    讨论
    参考文献
    结论
    综述
    英文缩略词表
    致谢



    本文编号:3861903

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