甲基苯丙胺通过miR-129-5p/FAM104B分子轴介导大鼠胚胎成纤维细胞损伤

发布时间：2024-02-25 15:34

　　目的探究甲基苯丙胺(METH)是否通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴从而影响大鼠胚胎成纤维细胞(REF)损伤。方法 MTT实验检测不同浓度甲基苯丙胺对REF细胞活力的影响;流式细胞术检测REF凋亡情况, Western blot检测增殖和凋亡相关蛋白的表达;qRT-PCR检测miR-129-5p与FAM104B的表达表达量;双荧光素酶实验验证miR-129-5p与FAM104B的靶向结合关系。结果甲基苯丙胺可抑制REF细胞增殖,促进细胞凋亡,还可促进miR-129-5p的表达,抑制FAM104B的表达。双荧光素酶实验证实miR-129-5p可靶向调控FAM104B的表达。miR-129-5p过表达明显抑制了细胞增殖,促进细胞凋亡。沉默FMA104B可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。抑制miR-129-5p表达或FMA104B过表达可明显降低METH对REF细胞增殖及凋亡的作用。结论甲基苯丙胺通过调控miR-129-5p/FAM104B分子轴而抑制REF增殖及促进细胞凋亡。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞转染与分组
    1.4 细胞分组与处理
    1.5 qRT-PCR实验
    1.6 MTT实验
    1.7 Annexin V-FITC流式细胞术实验
    1.8 Western blot实验
    1.9 双荧光素酶实验测定
    1.10 统计学方法
2 结果
    2.1 METH抑制REF增殖促进细胞凋亡
    2.2 METH促进大鼠胚胎细胞中miR-129-5p表达和抑制FAM104B表达
    2.3 miR-129-5p靶向负调控FAM104B表达
    2.4 过表达miR-129-5p抑制大鼠胚胎细胞增殖并促进细胞凋亡
    2.5 沉默FAM104B对大鼠胚胎细胞增殖和凋亡的影响
    2.6 METH通过miR-129-5p调控FAM104B介导大鼠胚胎细胞增殖和凋亡的影响
3 讨论



本文编号：3910522