丙泊酚对老年雄性大鼠认知功能及海马生物钟基因表达的影响及机制研究

发布时间：2017-04-06 16:05

  本文关键词：丙泊酚对老年雄性大鼠认知功能及海马生物钟基因表达的影响及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景与目的：丙泊酚（Propofol）是常用的静脉麻醉药，但在其广泛应用中发现丙泊酚有遗忘作用，这可能是其导致术后认知功能障碍（POCD）的诱因。POCD是临床术后常见的中枢神经系统并发症且其发生率一直居高不下，但其具体发生机制尚未明确。高龄是其目前唯一明确而有意义的影响因素。大脑的海马区主要负责机体的学习记忆和空间定位，且与突触可塑性的关系非常密切。长期突触可塑性主要有长时程增强（LTP）和长时程抑制（LTD）两种表现形式，被公认为是机体学习记忆功能的神经基础。生物钟基因对神经元的可塑性形成和学习记忆等方面有调控作用，但丙泊酚诱使POCD发生的机制与生物钟基因之间的关系尚不清楚。本实验主要研究丙泊酚对认知功能及海马生物钟基因表达的影响，为临床进一步研究提供参考。 实验通过观察丙泊酚对老年雄性大鼠学习记忆能力的影响，及其对海马生物钟基因表达的影响，探讨丙泊酚诱使POCD发生的机制与生物钟基因的关系。 方法： 老年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠（体重为500g-550g，，18个月月龄）72只，随机分为3组，丙泊酚30mg/（kg·h）组、丙泊酚50mg/（kg·h）组和对照组，每组24只。丙泊酚30mg/（kg·h）组和丙泊酚50mg/（kg·h）组分别按各自剂量，持续静脉泵注丙泊酚4h，对照组避免应激4h。分别于苏醒后0h、4h、24h和72h，每组随机选取6只大鼠进行Morris水迷宫实验测定大鼠空间学习记忆能力，测试结束后将大鼠进行断头处死，取其海马组织，提取组织总RNA后，应用实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）对Per2、Dbp、Arc、Egr1、Krox20和NGFI-B进行定量检测和分析。 结果： 1．Morris水迷宫测试结果：（1）定位航行实验：麻醉后P30组和P50组的潜伏期比C组长，差异有统计学意义（P＜0.05），且P50组比P30组潜伏期延长更明显（P＜0.05）；P30组术后0h、4h和24h时间点与术前比较差异有统计学意义（P＜0.05）；P50组麻醉后与术前比较差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）空间探索实验结果：术前各组大鼠穿越原平台次数，比较差异无统计学意义（p＞0.05）；P30组和P50组穿越原平台次数比C组减少（P＜0.05），P50组穿越原平台次数比P30组减少更明显（P＜0.05）；术后72h时间点与术后24h比较，P30组和P50组穿越原平台次数有所增加（P＜0.05）。 2．RT-qPCR定量检测结果：（1）Per2基因：P30组和P50组术后0h、4h、24h与C组比较，表达量减少（P＜0.05），P50组较P30组per2的表达量减少更明显（P＜0.05），随着时间的延长，差异缩小，P30组术后24h时与C组比较差异无统计学意义（P＞0.05），P50组术后72h与C组比较，Per2基因的表达量少；（2）Arc基因：P30和P50在术后0h、4h与C组比较Arc的表达量减少（P＜0.05）；术后24小时P30组与C组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），P50组术后72h时与C组比较，Arc的表达量少（P＜0.05）；（3）Egr1基因：P30和P50在术后0h、4h的Egr1的表达量减少（P＜0.05）；术后24小时P30组与C组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），P50组术后72h时与C组和P30组比较，Egr1的表达量少（P＜0.05）（4）NGFI-β基因：P30组和P50组在术后0h、4h、24h时与C组比较NGFI-β的表达量减少，且P50组比P30组减少明显（P＜0.05）；术后72小时P30组和P50组与C组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（5）Dbp基因：P30组和P50组在术后0h、4h、24h与C组比较，Dbp的表达量增加（P＜0.05），且P50组较P30组Dbp的表达量增加的更明显（P＜0.05），术后72h时P30组和P50组与C组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（6）Krox20基因：Krox20基因：P30和P50术后各时间点与C组比较，Krox20的表达量大幅度降低（P＜0.05），P30组与P50组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论： 1.丙泊酚静脉麻醉可导致大鼠的空间学习记忆能力下降，大剂量的用药可能会加重这种损伤，但短时间内可恢复。 2.丙泊酚能够影响生物钟基因的表达，可能与丙泊酚诱使POCD产生有关。 本研究的创新点：选择老年雄性大鼠，采用贴近临床实际的持续静脉泵注方式给药，比较了30mg/（kg·h）和50mg/（kg·h）剂量丙泊酚静脉泵注4h后，分别在苏醒后0h、4h、24h和72h，四个不同时间点进行Morris水迷宫测试，从行为学角度，观察大鼠空间学习记忆能力的变化后，应用RT-qPCR技术对基因进行定量检测分析。综合探讨分析丙泊酚对大鼠空间学习记忆能力的影响及其机制。为临床的进一步研究提供参考。
【关键词】：丙泊酚 认知障碍 Morris水迷宫 海马 生物钟基因
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 前言4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-14
• 英文缩略词表14-15
• 第1章 绪论15-17
• 第2章 文献综述17-25
• 2.1 术后认知功能障碍的研究进展17-20
• 2.2 丙泊酚对术后认知功能障碍影响的研究进展20-22
• 2.3 学习记忆与基因22-23
• 2.4 小结23-25
• 第3章 实验研究一：丙泊酚麻醉对老年雄性大鼠空间学习记忆能力影响的实验研究25-30
• 3.1 研究目的25
• 3.2 实验材料25
• 3.3 实验方法25-27
• 3.4 统计学分析27
• 3.5 实验结果27-29
• 3.6 小结29-30
• 第4章 实验研究二：丙泊酚对老年雄性大鼠生物钟基因表达影响及机制的实验研究30-40
• 4.1 实验材料30-32
• 4.2 实验方法32-36
• 4.3 统计方法36
• 4.4 实验结果36-40
• 第5章 讨论40-43
• 参考文献43-48
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果48-49
• 致谢49

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 贾翠英;;HIE患儿血浆SOD、S100B蛋白测定的临床意义[J];放射免疫学杂志;2009年01期

2 覃怡;谢玉波;唐小曼;陈静;利莉;;异丙酚对大鼠空间学习记忆及海马突触结构的影响[J];广东医学;2009年05期

3 吴飞健,吴政星,陈其才;GABA:一种重要的中枢抑制性神经递质[J];高等函授学报(自然科学版);1997年01期

4 赵卓;胡占升;时利德;;丙泊酚对大鼠认知能力及海马神经颗粒素磷酸化水平的影响[J];解剖科学进展;2010年03期

5 孙雪华;曾邦雄;;丙泊酚的麻醉作用机制[J];临床麻醉学杂志;2008年04期

6 熊鹰，张长城;基因与学习记忆调控[J];生理科学进展;1995年04期

  本文关键词：丙泊酚对老年雄性大鼠认知功能及海马生物钟基因表达的影响及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：289173