大鼠双肝移植后双侧移植物体积变化的研究

发布时间：2020-12-26 23:06

　　目的:探索大鼠双肝移植后双侧移植物体积变化差异的原因及机制。方法:（1）建立大鼠双供体肝移植模型:SPF级SD雄性大鼠96只,8-10周龄,体重（270g-300g）,随机分为移植组（Transplantation group,n=72）和假手术组（对照组）（Sham group,n=24）,移植组随机2只作为供体,1只作为受体。通过增加SD大鼠体重、获取供体合适胆管长度、修剪Y型髂血管等技术建立并改进大鼠双肝移植模型,提高其稳定性;（2）基于体重和苏醒时间,测定双肝移植大鼠的最适麻醉剂量;（3）通过核磁共振（MRI）连续动态观察大鼠双肝移植后双侧移植物的体积变化;（4）通过超声连续观察双侧移植物的门静脉血流速（cm/s）度及血流量（cm³/s）;（5）血液标本提取血清后使用全自动生化仪检测移植后双肝大鼠不同时间点的生化指标;（6）从形态学角度测量双侧移植物的体积和质量,检测双移植物生长情况;（7）HE染色法在检测移植后不同时间点双侧移植物的病理变化;（8）RT-PCR、western-blot法检测双侧移植物caspase-3等凋亡蛋白在移植后不同时间点的表达情... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

.2.1大鼠双肝移植模型的建立及优化实验的总体

兰州大学硕士学位论文大鼠双肝移植后双侧移植物体积变化的研究6图1.1大鼠双肝移植过程手术图解Figure1.1Thediagrammaticdrawingofoperationprocessondual-graftslivingdonorlivertransplantationinrat供体的获取大鼠均在4%水合氯醛麻醉下进行，手术麻醉后剃腹部毛，取腹正中切口，用器械固定好大鼠，开腹游离肝脏周围韧带，仔细分离组织，结扎左膈下静脉，左右肝管汇合处下5mm处切开胆总管前壁插管环扎，断开远端。切断不需要的肝叶保留需求肝，基于解剖位置门静脉与大鼠肝脏右上叶相连，双侧移植物为肝右上叶（24.2%），仔细处理肝脏创面，避免出血。游离下腔静脉和右肾静脉并结扎。双侧移植物获取用5-0丝线结扎离断肝左外叶、左中叶、中叶、双尾状叶，剩余右上叶。供肝减体积后通过腹主动脉全身肝素化，再经腹主动脉穿刺对肝脏进行灌注。分离结扎并切断幽门静脉、脾静脉、胃十二指肠静脉，缝扎肝固有动脉，分别取下供肝，置于4℃生理盐水中保存，待移植入受体。Y型血管获取重建双供体与受体间的门静脉和胆道，取作为供体大鼠的下腔静脉与髂血管之间Y型部分，进行双供体与受体间门静脉重建，精细寻找髂血管周围的分支小血管并离断结扎，4～5根左右，Y型上端端口分别插入袖口（如果第一只供体髂血管由于各种原因破损，则可以取第二只供体髂血管）。供体的修剪和双供体连接仔细检查供体边缘有否出血，避免移植后渗血，

兰州大学硕士学位论文大鼠双肝移植后双侧移植物体积变化的研究14第三章实验结果3.1大鼠双供体肝移植模型的建立及优化通过实验发现与Chen于2012的大鼠双肝移植方法相比，通过增加大鼠体质量、适度的胆管长度、修剪Y型血管、“三角形法”吻合的方法可以改进该模型的稳定性（图1.2）；改进后的模型生存率明显提高，7天生存率由58.3%提高至87.5%，30天生存率为68.8%（图1.3）。图1.2改进的手术操作技巧(A)供体胆管插管；(B)右侧移植物增加右外叶；(C)修剪Y型髂血管；(D)三角形法吻合肝上下腔静脉Figure1.2.Theimprovedoperationtechniques(A)Bileductintubation:theoptimumlengthwas5mmundertheliver.(B)Addingrightlaterallobetotherightgraft.(C)TrimmingY-shapedveinsandsuturingofsmallbranchesofbloodvessels.(D)Reconstructionoftheinferiorvenacavaby“trianglepullingmethod”


本文编号：2940608