Btk在粪肠球菌感染的大鼠根尖周炎中的表达研究

发布时间：2017-04-11 03:16

  本文关键词：Btk在粪肠球菌感染的大鼠根尖周炎中的表达研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:建立以粪肠球菌感染的实验性大鼠根尖周炎模型,研究大鼠根尖周病变过程中布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)mRNA的表达变化,探讨粪肠球菌对Btk表达的影响。方法:研究对象为成年健康的雄性SD大鼠32只,采用10%水合氯醛(0.35-0.40ml/100g体重)腹腔注射麻醉大鼠,随机分为A、B两组,每组各16只,以大鼠右侧下颌第一磨牙为实验组,对大鼠磨牙行开髓术。A组(未封菌组):髓腔内封入浸有PBS缓冲液的无菌小棉球;B组(封菌组):髓腔内封入浸有粪肠球菌菌悬液的小棉球。随后两组均采用进口玻璃离子对开髓的牙齿进行充填以封闭髓腔。以大鼠的左下第一磨牙作为正常对照组。常规条件饲养,分别在开髓后的1、2、3、4周,各选取4只实验大鼠,乙醚深度麻醉并快速处死,分离大鼠的下颌骨,刮取大鼠下颌第一磨牙根尖区的组织,进行充分研磨,提取并纯化所提取组织的RNA,逆转录成cDNA,采用Real-time PCR检测各实验组的Btk mRNA的表达水平,并进行统计学分析。结果:1.A组术后2、3、4周Btk mRNA的表达量与正常对照组相比明显增高,差异均具有统计学意义(P0.05);A组1周术后Btk mRNA表达量与正常对照组相比略有增高,差异无统计学意义(P0.05)。2.B组术后1、2、3、4周各时间点Btk mRNA的表达量均高于正常对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。3.A、B两组在术后1至2周Btk mRNA的表达水平逐渐增高,2周时达峰值,于3周时表达开始逐渐降低,4周表达水平持续降低。A组Btk mRNA基因表达量在术后1、2、3、4周之间两两比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。B组Btk mRNA表达量在术后2周和3周分别于其他时间点两两比较,差异有统计学意义(P0.05)。4.在术后1周、2周、3周、4周各时间点上,B组Btk mRNA的表达水平均高于A组,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.Btk参与了整个根尖周炎的发生和发展过程,并在此过程中Btk的表达量增高。2.粪肠球菌的存在增强了大鼠根尖周炎中Btk的表达,其表达情况与根尖周炎的进程密切相关。
【关键词】：酪氨酸激酶Btk SD大鼠 Real-time PCR 粪肠球菌 根尖周炎
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R781.34
【目录】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 材料和方法14-21
• 1.实验材料14-16
• 1.1 实验动物14
• 1.2 实验主要试剂14-15
• 1.3 实验主要仪器设备15
• 1.4 试剂的配置15-16
• 2.实验方法16-21
• 2.1 实验动物及分组16-17
• 2.2 建立实验性根尖周炎大鼠模型17
• 2.3 根尖周组织取材17-18
• 2.4 提取组织总 RNA18-19
• 2.5 RNA逆转录成cDNA19
• 2.6 设计和合成引物19-20
• 2.7 实时荧光定量PCR反应20
• 2.8 PCR产物的分析20-21
• 3.数据的收集和整理21
• 4.统计学的分析21
• 实验结果21-27
• 1. 琼脂凝胶电泳21
• 2. 目的基因与管家基因的扩增曲线和溶解曲线21-23
• 3. 统计学分析23-27
• 讨论27-30
• 结论30-31
• 参考文献31-36
• 综述36-44
• 参考文献40-44
• 致谢44-45

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