甲醛和苯联合作用对小鼠免疫系统的毒性作用

发布时间：2017-04-19 15:03

  本文关键词：甲醛和苯联合作用对小鼠免疫系统的毒性作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：经济的发展和生活水准的提高,使得室内装修越来越流行,因此,室内装修装饰材料所释放的各种挥发性有机化合物导致室内空气严重污染。在室内挥发性有机化合物当中,尤其是甲醛(Formaldehyde, FA)和苯(Benzene, BZ)因其浓度高和危害大而备受瞩目。关于甲醛和苯的单独免疫毒性效应研究国内外学者开展了大量的研究工作,而关于二者联合的免疫毒性效应及其相关机制的研究报道不多。因此,本课题通过对BALB/c小鼠进行甲醛和苯联合染毒,从免疫器官、免疫细胞、免疫分子以及免疫反应等方面来探究甲醛和苯联合作用下对小鼠的免疫系统的毒性作用以及初步探讨其相关机制。方法：选择30只健康的雄性BALB/c小鼠,随机分为5组,每组6只。实验动物分组是(1)空白对照组(Ctrl)；(2)玉米油对照组(Oil),灌胃体积为5mL/kg bw/day;(3)苯单独染毒组(BZ)：该实验组的灌胃浓度为150 mg/kg bw/day;(4)甲醛单独染毒组(FA)：气态甲醛浓度为3.0 mg/m3的气体,使该组小鼠暴露于此气体中；(5)苯和甲醛联合染毒组(BZ+FA):在暴露日每天上午先对该组小鼠进行苯的玉米油溶液灌胃,之后再进行气态甲醛的暴露,苯的灌胃方式、浓度以及时间同BZ组,气态甲醛的暴露浓度、时间及方式和FA组一致。每天8个小时,每周五天,连续两周。染毒周期结束后,对小鼠进行麻醉处死并进行一系列的生理生化指标的测定和观察。结果：1.甲醛组和苯组对小鼠的体重增长与对照组相比基本没有影响,但是二者联合染毒组能够导致小鼠体重增长的幅度明显减小；2.甲醛组对小鼠外周血中的白细胞、淋巴细胞、粒细胞以及单核细胞的数目基本没有影响,但是苯组和二者联合染毒组能够使小鼠外周血中的白细胞、淋巴细胞、粒细胞以及单核细胞的数目与对照组相比有显著性的降低(p0.05),并且二者联合染毒组的小鼠外周血中的白细胞、淋巴细胞与苯组相比有显著性的降低(p0.05)；3.苯组和联合染毒组能够导致小鼠脾脏系数显著性地降低(p0.05)；4.三个染毒组都能对小鼠的骨髓和脾脏有核细胞造成不同程度的氧化损伤和DNA损伤,在某些生化指标上苯和甲醛联合染毒组造成的损伤程度显著大于二者单独染毒组；5.三个染毒组都能导致小鼠的脾脏有核细胞不同程度的活化caspase-3表达量的升高(p0.05)；6.三个染毒组都能导致小鼠脾脏的免疫组织形态受到损伤,苯和甲醛联合染毒组小鼠脾脏所受到的损伤程度显著大于二者单独染毒组；7.苯和甲醛联合染毒组能够显著抑制小鼠的脾脏T细胞增殖能力和降低小鼠血清中溶血素滴度。结论：甲醛和苯都能够对小鼠免疫系统产生不同程度的毒性作用,二者联合作用于小鼠对其免疫系统的毒性作用具有一定的协同作用。免疫器官的组织细胞的氧化性损伤和DNA损伤之间的相互作用,可能是使小鼠脾脏免疫组织形态受损,最终引起小鼠的免疫功能受损的重要机制。
【关键词】：甲醛 苯 联合染毒 免疫系统 脾脏
【学位授予单位】：华中师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R114
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-13
• 1. 绪论13-22
• 1.1 甲醛及其免疫毒性研究13-17
• 1.1.1 甲醛概况13-15
• 1.1.2 甲醛的免疫毒性研究15-17
• 1.2 苯及其免疫毒性研究17-20
• 1.2.1 苯的概况17-18
• 1.2.2 苯的免疫毒性研究18-20
• 1.3 免疫系统20-21
• 1.4 选题目的及意义21-22
• 2. 材料与方法22-36
• 2.1 实验材料22-25
• 2.1.1 实验动物22
• 2.1.2 主要实验仪器22-23
• 2.1.3 主要实验试剂及试剂盒23
• 2.1.4 主要实验试剂的配制方法23-25
• 2.2 实验方法25-36
• 2.2.1 气态甲醛的发生和暴露25
• 2.2.2 实验动物分组与暴露方案25-27
• 2.2.3 血液全血细胞计数及血清的制备27
• 2.2.4 主要免疫器官有核细胞悬液的制备27
• 2.2.5 骨髓和脾脏有核细胞内活性氧(ROS)水平的测定27-28
• 2.2.6 骨髓和脾脏有核细胞内丙二醛(MDA)含量的测定28
• 2.2.7 骨髓和脾脏有核细胞内核酸蛋白交联(DPC)系数的测定28-29
• 2.2.8 脾脏有核细胞内谷胱甘肽(GSH)含量的测定29
• 2.2.9 脾脏T淋巴细胞增殖能力的检测29-30
• 2.2.10 脾脏有核细胞凋亡的检测30-32
• 2.2.11 脾脏组织石蜡切片的制备及H&E染色32-33
• 2.2.12 脾脏RNA的提取33
• 2.2.13 反转录PCR33
• 2.2.14 脾脏组织中TNF-α、IL-6、IL-2 mRNA表达水平的检测33-34
• 2.2.15 血凝法检测血清中溶血素滴度34-35
• 2.2.16 足跖厚度增加法检测小鼠迟发型变态反应35
• 2.2.17 统计学分析35-36
• 3. 结果与分析36-50
• 3.1 甲醛和苯联合作用对小鼠的体重变化的影响36-37
• 3.2 甲醛和苯联合作用对小鼠外周血中相关免疫细胞数量的影响37-38
• 3.3 甲醛和苯联合作用对小鼠主要免疫器官的毒性效应38-44
• 3.3.1 甲醛和苯联合作用对小鼠脾脏脏器系数的影响38-39
• 3.3.2 甲醛和苯联合作用对小鼠骨髓和脾脏有核细胞的ROS水平的影响39
• 3.3.3 甲醛和苯联合作用对小鼠骨髓和脾脏有核细胞内MDA含量的影响39-40
• 3.3.4 甲醛和苯联合作用对小鼠骨髓和脾脏有核细胞内DPC交联系数的影响40-41
• 3.3.5 甲醛和苯联合作用对小鼠脾脏有核细胞内GSH含量的影响41-42
• 3.3.6 甲醛和苯联合作用对小鼠脾脏组织细胞的凋亡的影响42-44
• 3.3.7 甲醛和苯联合作用小鼠脾脏组织切片病理学观察结果44
• 3.4 甲醛和苯联合作用对小鼠脾脏组织中TNF-A、IL-6、IL-2 MRNA 的表达水平的、影响44-47
• 3.5 甲醛和苯联合作用对小鼠相关免疫反应指标的影响47-50
• 3.5.1 T淋巴细胞增殖能力测定47
• 3.5.2 小鼠血清溶血素滴度47-49
• 3.5.3 小鼠迟发型变态反应49-50
• 4. 讨论50-59
• 4.1 甲醛和苯在体内的代谢过程50
• 4.2 甲醛和苯联合作用对小鼠体重和脏器系数的影响50-51
• 4.3 甲醛和苯联合作用对小鼠外周血中相关免疫细胞数量的影响51-52
• 4.4 甲醛和苯联合作用对小鼠主要免疫器官的损伤作用52-57
• 4.4.1 甲醛和苯联合作用对小鼠主要免疫器官的氧化损伤及DNA损伤52-53
• 4.4.2 甲醛和苯联合作用对小鼠脾脏有核细胞凋亡的影响53-55
• 4.4.3 甲醛和苯联合作用对小鼠脾脏中相关细胞因子的表达水平的影响55-57
• 4.4.4 甲醛和苯联合作用致脾脏的组织病变57
• 4.5 甲醛和苯联合作用对小鼠相关免疫反应的影响57-59
• 5. 结论与展望59-60
• 参考文献60-68
• 附录68-69
• 攻读学位期间论文发表情况69-70
• 致谢70

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 蔡凤云;王萌;王婧;秦龙娟;杨旭;;邻苯二甲酸二丁酯对体外大鼠肝脏细胞的氧化损伤作用[J];公共卫生与预防医学;2009年04期

2 刘爱平;张晓林;杨安平;;甲醛吸入对小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2水平的影响[J];佛山科学技术学院学报(自然科学版);2008年03期

3 高兴民,张萍华,钱仁俊,姚汝琳;甲醛引起的临床症状与接触浓度关系的探讨[J];劳动医学;1988年01期

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5 张晓田;Caspase-3与细胞凋亡的研究[J];医学综述;2002年11期

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本文编号：316511