富氢水通过抑制NMDA受体转运和MnSOD硝化预防大鼠瑞芬太尼痛觉过敏

发布时间：2017-04-26 10:16

  本文关键词：富氢水通过抑制NMDA受体转运和MnSOD硝化预防大鼠瑞芬太尼痛觉过敏，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：瑞芬太尼是超短效的μ-阿片受体激动剂,因具有起效快和无蓄积等特点被广泛用于临床手术全身麻醉中镇痛。但其镇痛作用消除快也使瑞芬太尼诱发痛觉过敏(Remifentanil-induced hyperalgesia,RIH)的发生率明显高于其他阿片药物。近期相关临床调查发现,术中瑞芬太尼以0.1-0.5μg·kg-1·min-1临床常用剂量输注会增加患者术后对镇痛药物的需求,引发痛觉过敏现象。RIH的效应很大程度上限制了瑞芬太尼的临床应用,因此有必要探讨有效的预防措施。本课题组前期研究表明,RIH的形成与脊髓背角含NR2B亚基N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体转运增加相关。过氧化物是一种新的痛敏通路介导者,NMDA受体活化可致其合成增多,从而介导锰超氧化物歧化酶(MnSOD)硝基化失活,最终诱发痛敏。氢是一种新型抗氧化剂,可选择性中和活性氧自由基,减少过氧化反应。而氢能否通过抑制过氧化反应减少RIH发生,尚无确切报道。本研究拟评价富氢水(Hydrogen-rich saline,HRS)对RIH的预防作用并探讨其机制是否为抑制脊髓背角含NR2B亚基NMDA受体转运和MnSOD硝基化,为其临床预防提供新思路。目的通过腹腔注射不同剂量富氢水,探讨其对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛阈的影响,并选择最佳预防剂量;通过腹腔注射最佳预防剂量富氢水,评价其对切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓背角NMDA受体转运和MnSOD硝化的影响;通过鞘内注射选择性NR2B亚基拮抗剂Ro25-6981,探讨含NR2B亚基NMDA受体在富氢水抑制瑞芬太尼痛觉过敏和MnSOD硝化中的作用。方法一雄性SD大鼠80只(240~260g),随机分为8组(n=10):C组(生理盐水NS组);C+H1,C+H2,C+H3组(NS输注后分别腹腔注射HRS 2.5ml/kg,5ml/kg,10ml/kg);R组(瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1,1h,iv);H1,H2,H3组(瑞芬太尼输注后分别腹腔注射HRS 2.5ml/kg,5ml/kg,10ml/kg)。富氢水注射前5min、注射后5、10、15、20、30、45和60min监测动脉和静脉血中氢气浓度;富氢水注射前5min、注射后15和45min行动脉血气分析;富氢水注射前2h、注射后2h、6h、24h、48h测定大鼠机械刺激缩足阈值(PWT)和热刺激缩足潜伏期(PWL)。方法二雄性SD大鼠80只(240~260g),随机分为8组(n=10):C组(假手术组;NS,iv);I组(NS,iv);G组(甘氨酸15μg·kg-1·min-1,1h,iv);R组(瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1,1h,iv);H+C组(HRS,ip;假手术组;NS,iv);H+I组(HRS,ip;NS,iv);h+g组(hrs,ip;甘氨酸,iv);h+r组(hrs,ip;瑞芬太尼,iv)。除c和h+c组,其余6组均建立切口痛模型;hrs(10ml/kg)于ns、甘氨酸和瑞芬太尼输注后腹腔注射。瑞芬太尼给药前1d、输注后1、2、3、5和7d测定大鼠pwt和pwl,最后处死大鼠并取脊髓背角l4-6节段,采用免疫组化和westernblot法测定总蛋白及膜蛋白nr2a和nr2b亚基的表达和转运,采用rt-qpcr和westernblot法测定mnsod的表达和硝化水平。方法三雄性sd大鼠80只(240~260g),随机分为8组(n=10):c组(假手术组;ns,iv);c+ro3组(假手术组;ns,iv;ro25-698150μg,it);r组(瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1,1h,iv);ro1、ro2、ro3组(ro25-69815、10、50μg;it);h组和ro1+h组。除c和c+ro3组,其余6组均建立切口痛模型;ro25-6981于瑞芬太尼输注前10min鞘内注射;hrs(2.5ml/kg)于瑞芬太尼输注后腹腔注射。瑞芬太尼给药前1d、输注后1、2、3、5和7d测定大鼠pwt和pwl,最后处死大鼠并取脊髓背角l4-6节段,采用westernblot法测定mnsod的硝化水平。结果一腹腔给予富氢水后,血中氢气浓度于5min开始增加,15min达峰值,45min恢复正常水平,且存在剂量依赖(p0.01);与c组相比,r、h1、h2和h3组的pwt和pwl明显降低(p0.01),与r组相比,h2和h3组的pwt和pwl明显升高,且存在剂量依赖(p0.01),10ml/kg富氢水的效果优于5ml/kg(p0.01),动脉血氢气最低有效浓度高于10μmol/l;不同剂量的富氢水注射后动脉血ph、pao2、paco2和sao2未见明显改变(p0.05)。结果二与c组相比,i、g、r和h+i、h+g、h+r组的pwt和pwl明显降低(p0.01),与i组相比,r组的pwt和pwl显著降低,且持续至少7天(p0.01),膜/总蛋白中nr2b的表达和转运增加(p0.01),mnsod硝化水平升高(p0.01);与r组相比,h+r组的pwt和pwl明显升高(p0.01),nr2b的表达和转运减少(p0.01),mnsod硝化水平下降(p0.01);各组nr2a和mnsod水平均无显著差异(p0.05)。结果三与c组相比,r、ro1、ro2、ro3、h组和ro1+h组的pwt和pwl明显降低(p0.01);与r组相比,ro2、ro3组的pwt和pwl明显升高,mnsod硝化水平下降,且存在剂量依赖(p0.01);与r组相比,ro1和h组pwt和pwl无明显变化(p0.05),而小剂量ro25-6981和富氢水联用时可有效减轻痛敏并抑制mnsod硝化(p0.01)。结论腹腔注射富氢水对大鼠瑞芬太尼痛觉过敏具有预防作用,且存在剂量依赖(10ml/kg疗效最佳);大鼠切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏现象可持续7天以上;富氢水能显著减轻大鼠切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏并抑制其脊髓背角NR2B膜转运和MnSOD硝基化;鞘内注射Ro25-6981能显著减轻大鼠切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏并抑制其脊髓背角MnSOD硝基化,且存在剂量依赖(50μg疗效最佳);富氢水预防RIH机制可能是抑制大鼠脊髓背角含NR2B亚基NMDA受体的表达和转运,从而减少MnSOD硝化。
【关键词】：瑞芬太尼 痛觉过敏 富氢水 Ro25-6981 NR2B MnSOD
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-13
• 缩略语/符号说明13-15
• 前言15-19
• 研究现状、成果15-18
• 研究目的、方法18-19
• 一、腹腔注射不同剂量富氢水对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛阈的影响19-30
• 1.1 对象和方法19-22
• 1.1.1 实验材料19-20
• 1.1.2 实验方法20-22
• 1.2 结果22-25
• 1.2.1 富氢水能够改善瑞芬太尼痛觉过敏症状，且 10ml/kg的效果最佳22-23
• 1.2.2 氢气血药浓度测定结果23-24
• 1.2.3 动脉血气分析结果24-25
• 1.3 讨论25-29
• 1.3.1 阿片药物痛觉过敏现象25
• 1.3.2 RIH现象的实验依据25-26
• 1.3.3 动物模型的建立26-27
• 1.3.4 HRS与RIH27-28
• 1.3.5 实验结果讨论28-29
• 1.4 小结29-30
• 二、富氢水对切.痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓NMDA受体转运和MnSOD硝化的影响30-46
• 2.1 对象和方法30-38
• 2.1.1 实验材料30-33
• 2.1.2 实验方法33-38
• 2.2 结果38-42
• 2.2.1 富氢水能够有效减轻切.痛大鼠术后瑞芬太尼痛觉过敏38-40
• 2.2.2 富氢水能够减少切.痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓背角含NR2B亚基NMDA受体的表达和转运40-41
• 2.2.3 富氢水能够抑制切.痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓背角MnSOD硝基化41-42
• 2.3 讨论42-45
• 2.3.1 切口痛模型的选择42
• 2.3.2 甘氨酸在瑞芬太尼痛觉过敏中的作用42-43
• 2.3.3 HRS对切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏的预防作用43
• 2.3.4 HRS对RIH大鼠脊髓背角NMDA受体表达和膜转位的作用43-44
• 2.3.5 硝化应激在RIH中的作用44-45
• 2.4 小结45-46
• 三、含NR2B亚基NMDA受体参与了富氢水对瑞芬太尼痛觉过敏的预防作用46-54
• 3.1 对象和方法46-48
• 3.1.1 实验材料46
• 3.1.2 实验方法46-48
• 3.2 结果48-51
• 3.2.1 Ro25-6981能够改善瑞芬太尼痛觉过敏症状，，且 50μg的效果最佳48-49
• 3.2.2 Ro25-6981能够减少切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓背角MnSOD硝化，且 50μg的效果最佳49
• 3.2.3 含NR2B亚基NMDA受体参与了富氢水对瑞芬太尼痛觉过敏的预防作用49-50
• 3.2.4 富氢水抑制MnSOD硝化失活与含NR2B亚基NMDA受体有关50-51
• 3.3 讨论51-53
• 3.3.1 抑制NR2B活性对RIH的影响51-52
• 3.3.2 NR2B对RIH大鼠脊髓背角MnSOD硝化的作用52
• 3.3.3 含NR2B亚基NMDA受体参与了HRS的抗痛敏作用52-53
• 3.4 小结53-54
• 结论54-55
• 参考文献55-62
• 发表论文和参加科研情况说明62-64
• 综述 阿片药物诱发痛觉过敏的研究进展---其形成机制与临床防治64-77
• 综述参考文献72-77
• 致谢77

【共引文献】

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1 高优;方勇;李晓光;姚敏;俞为荣;徐鹏;;富氢盐水对严重烫伤延迟复苏大鼠肠道损伤的影响[J];蚌埠医学院学报;2013年10期

2 刘慧丽;马彩虹;张小青;杨艳;宋雪凌;郭向阳;;宫-腹腔镜检查患者联合应用帕瑞昔布钠和罗哌卡因对术后疼痛的影响[J];北京大学学报(医学版);2013年06期

3 张耀贤;张中军;;右美托咪定抑制瑞芬太尼诱发痛觉过敏的研究进展[J];广州医药;2014年01期

4 邹应芬;程蔚蔚;;抗氧化剂在子痫前期防治中的新进展[J];重庆医学;2014年06期

5 马菲菲;谭永星;林高翔;;氢气治疗心肌缺血-再灌注损伤相关机制的研究进展[J];广东医学;2014年03期

6 顾海慧;朱燕霞;花美仙;郭慧君;查占山;臧艳;钱宝华;;血小板保存前添加饱和氢气的作用研究[J];中国输血杂志;2014年04期

7 陈婷;张燕;田振军;;氢水对反复力竭运动大鼠海马组织氧化应激损伤及细胞自噬的影响[J];北京体育大学学报;2014年07期

8 陈玲坤;苏薇;莫朴;;帕瑞昔布治疗瑞芬太尼术后痛觉过敏的效果观察[J];广东医学院学报;2014年02期

9 高昂;刘渠;李宝山;张辰新;杨甲梅;;氢生理盐水对GalN/LPS引起大鼠急性肝损伤的保护作用[J];肝胆外科杂志;2014年03期

10 Nahid Jivad;Zahra Rabiei;;A review study on medicinal plants used in the treatment of learning and memory impairments[J];Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine;2014年10期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 于宁;卢燕;孙学军;翟所强;杨仕明;王秋菊;;饱和氢生理盐水对噪声性聋的预防作用[A];2012全国环境声学学术会议论文集[C];2012年

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1 姜洪;氢气抗糖基化终末产物对内皮细胞凋亡的影响及机制研究[D];第三军医大学;2013年

2 杜璐;中脑导水管周围灰质HCN通道参与大鼠神经病理性痛的机制研究[D];第三军医大学;2013年

3 谢克亮;氢气对脓毒症的保护效应及机制研究[D];天津医科大学;2013年

4 肖一丁;高压氧预处理与富氢生理盐水治疗对皮瓣缺血再灌注损伤影响的研究[D];北京协和医学院;2013年

5 赵岭;有机磷农药生物毒性及氢保护作用的研究[D];北京工业大学;2013年

6 刘成;靶向下调RVM区TPH2表达抑制小鼠瘙痒及其机制研究[D];华中科技大学;2013年

7 申荣喜;氢生理盐水对大鼠放射性肝损伤的保护作用及机制研究[D];第二军医大学;2013年

8 李东宇;氢生理盐水对猪扩大肝切除术后肝功能的保护作用及机制研究[D];第二军医大学;2013年

9 曹飞;富H_2溶液的辐射防护效应及其机制研究[D];第二军医大学;2013年

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3 董文芳;右美托咪定对术后机械痛觉阈值影响的临床研究[D];南方医科大学;2014年

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