糜酶对肝星状细胞增殖及转分化的影响
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【摘要】:目的观察糜酶(chymase)对肝星状细胞(HSC)增殖及转分化的影响,探讨糜酶在肝纤维化中的作用。方法用percoll密度梯度离心法分离、培养大鼠HSC,经系列浓度糜酶的作用后,分别进行如下实验:用噻唑比色法(MTT)检测HSC的增殖;Western blot检测细胞内效应蛋白α-SMA及TGF-β1的表达;用RT-PCR法检测TGF-β1及Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)m RNA的表达。结果肥大细胞(MC)糜酶(1、10、100 ng/ml)明显促进HSC增殖,在观察的范围内(1~100 ng/ml)呈质量浓度依赖性,糜酶质量浓度越高,刺激培养的肝星状细胞增殖的能力越强,最高达对照组(无糜酶刺激)的1.45倍(P0.05);Western blot检测结果显示:糜酶刺激HSC表达α-SMA及TGF-β1明显增强(各实验组与空白对照组比较,P0.05);RT-PCR法检测HSC上TGF-β1及Col-Ⅰm RNA的表达明显增强,此作用呈剂量依赖性(各实验组与空白对照组比较,P0.05)。结论肥大细胞糜酶刺激可明显激活HSC,并促进其增殖及转分化为肌成纤维细胞。
【作者单位】: 延边大学附属医院感染症科;
【关键词】: 肝星状细胞 糜酶 α-SMA TGF-β 胶原
【基金】:国家自然科学基金(30960372)
【分类号】:R575.2
【正文快照】: 肝纤维化是指肝脏纤维结缔组织的过度沉积,是细胞外基质合成和降解不平衡的结果。而肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化增殖是肝纤维化发生的中心环节[1]。HSC是肌成纤维细胞的主要来源。当肝脏损伤时静止状态的HSC转变为有增殖、收缩、迁移、促进炎症和纤维生成活性
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