力竭运动与钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及Hes1/Jagged1/Pax7含量的影响

发布时间：2023-11-11 14:57

　　实验目的研究力竭运动与钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及Hes1、Jagged1、Pax7含量的影响。实验方法将42只五周龄雄性SD大鼠随机分为7组,每组6只：安静对照组(control, C)、力竭运动即刻组(Exhaustive, EO)、力竭后24h组(E24)、力竭后48h组(E48)、钝挫伤即刻组(Contusion, DO)、钝挫伤24h组(D24)、钝挫伤48h组(D48)。力竭运动是进行一次力竭性下坡跑运动均达到力竭状态。安静对照组、各力竭运动组及钝挫伤组分别在安静状态、力竭后、钝挫伤后不同的时间点进行处死、取血。处死时用20%的乌拉坦麻醉,取左侧腓肠肌,将取下组织一分为二,一份立刻进行细胞培养实验,另一份先用液氮保存,后转-80℃冰箱保存,ELISA测定血清及骨骼肌中Hes1、Jaggedl、Pax 7含量的变化。另取新生鼠一只,取其左侧腓肠肌进行细胞培养实验。实验结果：(1)肌卫星细胞培养结果：成功分离消化了肌组织,在体外获得高纯度具有成肌能力-的肌卫星细胞；培养初期阶段,新生鼠的肌卫星细胞增殖速度最快,含量最高,培养第一天,培养皿中便可见少量纺锤形的单核细胞出现...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略词表
前言
第一部分 文献综述
    1 骨骼肌损伤修复与肌卫星细胞的关系
        1.1 骨骼肌概述
        1.2 骨骼肌的损伤与修复
        1.3 卫星细胞对骨骼肌损伤修复的影响
            1.3.1 卫星细胞的概述
            1.3.2 骨骼肌卫星细胞的分离和纯化
            1.3.3 骨骼肌卫星细胞的鉴定
        1.4 卫星细胞对骨骼肌损伤修复的影响
    2 Notch信号通路与骨骼肌损伤修复的关系
        2.1 Notch信号通路的概述
        2.2 Notch信号通路的作用机制
        2.3 Notch通路对骨骼肌损伤修复及卫星细胞的影响
    3 Hes1与骨骼肌损伤修复及卫星细胞的关系
        3.1 Hes1的概述
        3.2 Hes1基因的调控机制
        3.3 Hes1对骨骼肌损伤修复及卫星细胞的影响
    4 Jagged1与骨骼肌损伤修复及卫星细胞的关系
        4.1 Jagged1的概述
        4.2 Jagged1的调控机制
        4.3 Jagged1对骨骼肌损伤修复及卫星细胞的影响
    5 Pax7与骨骼肌损伤修复及卫星细胞的关系
        5.1 Pax7概述
        5.2 Pax7的调控机制
        5.3 Pax7对骨骼肌损伤修复及卫星细胞的影响
第二部分 实验部分
    1 实验对象与方法
        1.1 实验对象
        1.2 动物分组
        1.3 建立动物模型
            1.3.1 钝挫伤模型
            1.3.2 力竭运动模型
        1.4 实验取材
            1.4.1 安静对照组取材
            1.4.2 钝挫伤取材
            1.4.3 力竭运动组取材
            1.4.4 新生鼠取材
    2 实验仪器、试剂及方法
        2.1 细胞培养实验仪器
        2.2 实验试剂
        2.3 试剂配制
        2.4 大鼠骨骼肌卫星细胞的培养方法
            2.4.1 大鼠骨路肌卫星细胞培养的条件要求
            2.4.2 大鼠骨骼肌卫星细胞的分离与培养
        2.5 酶联免疫实验的方法(ELISA)
        2.6 测定蛋白含量的方法
            2.6.1 蛋白测定条件
            2.6.2 蛋白含量的测定
    3 数据处理
    4 实验结果与分析
        4.1 力竭组、钝挫伤组及新生鼠不同时期骨骼肌卫星细胞体外培养结果
            4.1.1 各组培养一天后骨骼肌卫星细胞的生长状况
            4.1.2 各组培养三天后骨骼肌卫星细胞的生长状况
            4.1.3 各组培养五天后骨骼肌卫星细胞的生长状况
            4.1.4 各组培养七天后骨骼肌卫星细胞的生长状况
        4.2 力竭运动及钝挫伤不同时期大鼠骨骼肌、血清中Hes1、Jagged1、Pax7含量变化
            4.2.1 力竭运动与钝挫伤及恢复期间大鼠骨骼肌、血清中Hes1含量变化
            4.2.2 力竭运动及钝挫伤不同时期大鼠骨骼肌、血清中Jaggedl含量变化
            4.2.3 力竭运动及钝挫伤不同时期大鼠骨骼肌、血清中Pax7含量变化
    5 讨论与分析
        5.1 骨骼肌卫星细胞的培养
        5.2 安静对照组、力竭运动组、钝挫伤组及新生鼠体外培养卫星细胞增殖分化情况对比
        5.3 力竭运动、钝挫伤及其恢复期间大鼠Hes1、Jagged1、Pax7含量的变化
    6 结论
参考文献
致谢



本文编号：3862768