孕期及哺乳期铁补充对仔鼠铁负荷以及神经反射和学习记忆能力影响的研究

发布时间：2017-06-06 11:12

  本文关键词：孕期及哺乳期铁补充对仔鼠铁负荷以及神经反射和学习记忆能力影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究孕期及哺乳期母鼠铁补充对仔鼠铁负荷以及神经反射和学习记忆能力的影响及其相关机制。方法:将受孕第0日孕鼠随机分为三组:正常对照组(对照组,NC)、低剂量铁补充组(低铁组,LIS)和高剂量铁补充组(高铁组,HIS),每组10只,单笼饲养,自由进食全价颗粒饲料(含铁量为370 mg/kg),自由饮用去离子水。自妊娠第l日开始对孕鼠进行铁干预,腹腔注射右旋糖酐铁(低铁组、高铁组剂量分别为30 mg/kg·bw、120 mg/kg·bw,注射前用生理盐水将每只孕鼠所需右旋糖酐铁注射液稀释至2 ml),对照组腹腔注射生理盐水2 ml,每2日注射1次,直至仔鼠断乳。仔鼠出生后连续5w每周称量仔鼠体重,应用悬崖回避、平面翻正、负趋地性实验等测定仔鼠的神经反射功能,应用Morris水迷宫实验测定仔鼠学习记忆能力。水迷宫实验结束后对仔鼠进行麻醉,断头取血,全血静置30 min,3 000 r/min离心10 min,取上清,于-20℃冻存;迅速剥离全脑组织,置于冰冷生理盐水中漂洗,滤纸拭干后称重,于-80℃冻存。应用血清铁试剂盒测量仔鼠血清铁含量,应用组织铁试剂盒测量仔鼠脑组织铁含量,应用乙酰胆碱酯酶、一氧化氮合酶试剂盒分别检测仔鼠脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶(Ach E)、一氧化氮合酶(NOS)活力。结果:高铁组仔鼠血清铁含量为61.87μmol/L,显著高于对照组仔鼠的38.34μmol/L和低铁组仔鼠的38.45μmol/L(P均0.05),低铁组和对照组血清铁含量无差异(P0.05)。高铁组仔鼠脑组织铁含量3.28μmol/gprot,显著高于对照组仔鼠的1.84μmol/gprot(P0.05);低铁组仔鼠脑组织铁含量(2.46μmol/gprot)与对照组相比无差异(P0.05)。高铁组仔鼠的出生体重与对照组有显著差异(P0.05),低铁组仔鼠出生体重与对照组仔鼠相比,差异无统计学意义(P0.05)。自哺乳期至出生35 d,高铁组仔鼠体重显著低于对照组仔鼠,出生第7 d至35 d低铁组仔鼠体重也低于对照组仔鼠(P0.05),出生21 d开始,高铁组仔鼠体重低于低铁组仔鼠。神经反射试验结果:负趋地性试验中,高铁组仔鼠的平均达标日龄为8.60 d,显著高于对照组仔鼠的6.40 d和低铁组仔鼠的5.40 d(P均0.05),低铁组仔鼠与对照组仔鼠相比无差异(P0.05);悬崖回避试验中,高铁组仔鼠的平均达标日龄为6.90 d,显著高于对照组仔鼠的3.60 d和低铁组仔鼠的3.30 d(P均0.05),低铁组仔鼠与对照组仔鼠相比无差异(P0.05);平面翻正试验中,高铁组仔鼠平均达标日龄为6.10 d,显著高于对照组仔鼠的3.90 d和低铁组仔鼠的2.70 d(P均0.05),且低铁组仔鼠平均达标日龄显著低于对照组仔鼠(P0.05)。Morris水迷宫检测学习记忆能力实验结果:定位航行实验中,训练的第2日,高铁组仔鼠平均逃避潜伏期为37.80 s,显著长于对照组仔鼠的26.32 s(P0.05),但与低铁组仔鼠的31.93 s相比无差异(P0.05)。训练的第5日,高铁组仔鼠平均逃避潜伏期为23.76 s,显著长于对照组仔鼠的15.77 s和低铁组仔鼠的12.09 s(P均0.05)。空间探索实验中,三组仔鼠的游泳速度无差异(P0.05),穿越平台次数无差异(P0.05)。高铁组仔鼠脑组织匀浆中Ach E活力为0.18μmol/gprot显著高于对照组仔鼠的0.14μmol/gprot(P0.05),但与低铁组仔鼠的Ach E活力(0.17μmol/gprot)相比,差异无统计学意义(P0.05)。高铁组仔鼠脑组织匀浆中NOS活力为1.09μmol/gprot显著低于对照组仔鼠的1.53μmol/gprot(P0.05),但与低铁组仔鼠的NOS活力(1.20μmol/gprot)相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:孕期及哺乳期母鼠铁过量补充可影响仔鼠生长发育,损伤其神经反射功能,并且对仔鼠的学习记忆能力也可产生不良影响。仔鼠脑组织铁含量过高及Ach E活力升高、NOS活力下降可能是导致其学习记忆能力受损的重要原因。
【关键词】：孕哺期 铁补充 仔鼠 神经反射 学习记忆
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R153.1
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第1章 孕哺期铁补充对仔鼠铁负荷的影响10-16
• 1.1 材料与方法10-11
• 1.1.1 实验动物分组及处理10-11
• 1.1.2 主要试剂及仪器11
• 1.1.3 血清铁及脑铁含量的测定11
• 1.1.4 统计学处理11
• 1.2 结果11-14
• 1.2.1 孕哺期铁补充对仔鼠一般状况及体重的影响11-12
• 1.2.2 孕哺期铁补充对仔鼠血清铁含量的影响12-13
• 1.2.3 孕哺期铁补充对仔鼠脑组织铁含量的影响13-14
• 1.3 讨论14-16
• 第2章 孕哺期铁补充对仔鼠神经反射以及学习记忆能力的影响及机制研究16-30
• 2.1 材料与方法16-21
• 2.1.1 实验动物分组及处理16-17
• 2.1.2 主要试剂及仪器17
• 2.1.3 仔鼠神经行为学实验17-20
• 2.1.4 统计学处理20-21
• 2.2 结果21-27
• 2.2.1 神经反射结果21-22
• 2.2.2 学习记忆能力测定结果22-25
• 2.2.3 仔鼠脑组织Ach E、NOS活力25-27
• 2.3 讨论27-30
• 结论30-31
• 参考文献31-34
• 综述34-42
• 1.铁在体内代谢过程34-35
• 1.1 铁的吸收34
• 1.2 细胞铁运输与体内平衡34
• 1.3 铁在脑中运输和分布34-35
• 2.与铁过量相关的中枢神经系统疾病35-37
• 2.1 阿尔茨海默病35-36
• 2.2 帕金森病36
• 2.3 亨廷顿氏病36
• 2.4 其他与铁沉积有关神经系统疾病36-37
• 2.5 铁螯合物疗法37
• 3.酵母模型37-38
• 4.结束语38-39
• 综述 参考文献39-42
• 攻读学位期间的研究成果42-43
• 附录43-44
• 致谢44-45

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