有氧运动与黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黄疸致肝损伤的研究

发布时间：2017-06-21 11:11

  本文关键词：有氧运动与黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黄疸致肝损伤的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的:本课题选用阻塞性黄疸模型小鼠为实验对象,以黑果枸杞多糖或有氧运动的干预方式,探讨NF-κB信号通路在小鼠阻塞性黄疸致肝损伤的机理及阐述运动联合黑果枸杞多糖改善肝损伤的效果,为阻塞性黄疸的辅助疗法提供一种新的可行性实验基础和新的理论方向。研究方法:50只KM小鼠随机分为5组:假手术组10只(B组)、模型组10只(M组)、枸杞组10只(G组)、有氧运动组10只(Y组)、枸杞+运动组10只(G+Y组)。其中除假手术组外都以总胆管悬挂至腹壁48小时构建小鼠阻塞性黄疸的模型。枸杞组、枸杞+运动组小鼠于胆总管结扎术后2天进行黑果枸杞多糖灌胃,每天固定时间点,剂量为0.3 ml/次进行灌胃1次,共6W。有氧运动组、枸杞+运动组小鼠进行坡度为0%、速度为10m/min无负重训练,每天30min、每周不连续训练6天、保持6周的跑台的运动方案。干预结束后小鼠取材前一天晚上禁食处理,取材前先进行称重,麻醉完全后分离出肝脏组织,应用苏木精 伊红染色对比小鼠肝脏组织形态及结构的病理改变;免疫组化法检测肝脏组织NF-κB P65、NF-α的表达;Realtime-PCR技术检测肝组织中核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IκB激酶IKK-α,NF-κB的抑制蛋白IκB-α表达;血液生化检测血清总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量。研究结果:1.血清学结果:枸杞+运动组TBIL、ALT、AST含量较模型组显著降低(P0.01),枸杞组、有氧运动组的含量较模型组也有所下降(P0.05)。2.HE染色显示:假手术组小鼠肝细胞索呈放射状排列;模型组小鼠的肝细胞发生萎缩,肝索断裂,核固缩等,间质可见红细胞堆积;有氧运动组、枸杞组可见肝小叶结构不规则,肝索排列欠整齐,局部可见变性的脂肪细胞;枸杞+运动组效果最为显著,肝小叶完整,无变形及坏死现象。3.免疫组织化学结果显示:NF-κB P65、TNF-α在假手术组小鼠肝组织中几乎不表达较模型组显著性降低(P0.01);枸杞+运动组较枸杞组、有氧运动组、枸杞+运动组低(P0.01)。4.Real-time PCR结果显示:三个干预组与模型组比较,NF-κB、TNF-α、IKK-αmRNA表达明显增加(P0.01),枸杞+运动组表达量高与枸杞组和有氧运动组(P0.01),IκB-α的表达成相反趋势。TNF-α和NF-kBP65的表达成正相关,和IκB-α的表达成负相关。结论:1.长时间有氧运动和黑果枸杞多糖对小鼠阻塞性黄疸有干预作用,能改善肝损伤小鼠的免疫功能,对阻塞性黄疸小鼠的肝细胞具有修复作用。2.适量的有氧运动与黑果枸杞多糖对小鼠阻塞性黄疸有显著地治疗作用,其作用机制可能是通过抑制TNF-α介导的NF-κB信号通路发挥着关键的作用。
【关键词】：黑果枸杞多糖 有氧运动 阻塞性黄疸致肝损伤 NF-κB TNF-α
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：G804.2;R285.5
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 1 前言11-14
• 2 材料与方法14-23
• 2.1 实验动物14
• 2.2 主要试剂14-16
• 2.3 主要仪器16
• 2.4 实验方法16-23
• 2.4.1 实验技术路线图16-17
• 2.4.2 实验对象分组及模型的构建17-18
• 2.4.3 黑果枸杞多糖的提取与含量测定18-19
• 2.4.4 运动方案19
• 2.4.5 给药方案19
• 2.4.6 样品采集与处理19-20
• 2.4.7 血清指标检测20
• 2.4.8 病理学观察20
• 2.4.9 免疫组织化学染色20-21
• 2.4.10 Realtime-PCR程序21
• 2.4.11 Realtime-PCR技术检测NF-k B、TNF-α、IKK-α、IκB-αmRNA表达21-22
• 2.4.12 PCR数据统计22
• 2.4.13 质量控制22
• 2.4.14 统计学分析22-23
• 3 实验结果23-30
• 3.1 一般情况23
• 3.2 血清指标23-24
• 3.3 肝脏形态学观察24-25
• 3.4 各组小鼠肝脏NF-κBp65、TNF-α 免疫组织化学染色结果25-27
• 3.5 各组小鼠肝脏NF-kB、TNF-α、IKK-α、IκB-α 检测结果27-30
• 4 讨论30-34
• 4.1 KM小鼠阻塞性黄疸模型30
• 4.2 阻塞性黄疸与NF-kB信号通路相关因子30-31
• 4.3 有氧运动与黑果枸杞多糖的干预效应31-32
• 4.4 有待进一步研究的问题32-34
• 5 结论34-35
• 参考文献35-38
• 综述38-47
• 参考文献45-47
• 缩略词表47-48
• 科研情况48-49
• 致谢49

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1 郭音;有氧运动与黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黄疸致肝损伤的研究[D];湖南师范大学;2016年

2 吕晓鹏;黑果枸杞多糖的分离纯化与结构表征研究[D];西北大学;2012年

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本文编号：468473