海藻糖对吸入麻醉药异氟醚诱导转APP基因小鼠学习记忆功能损害的影响

发布时间：2017-06-30 14:11

  本文关键词：海藻糖对吸入麻醉药异氟醚诱导转APP基因小鼠学习记忆功能损害的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的： 探讨吸入性麻醉药异氟醚对转APP基因小鼠学习和记忆功能的影响，以及海藻糖的干预保护作用，进一步讨论海藻糖对异氟醚诱导转APP基因小鼠学习记忆功能保护作用的靶点。 方法： 选用健康12月龄转APP基因小鼠60只，随机分为3组（n=20）：空白对照组（Control组）、异氟醚麻醉组（Iso组）、海藻糖预处理组（Iso+Tre组）。麻醉前30min给予Iso+Tre组转APP基因小鼠海藻糖（剂量为400μg/kg，稀释于2ml生理盐水中）腹腔注射，Iso组腹腔注射2ml生理盐水，然后分别给予吸入两组小鼠3%异氟醚诱导，翻正反应消失后（约10±2min），以1.4%异氟醚持续吸入2h，麻醉过程中吸入氧浓度60%，氧流量1L/min。Control组在对应时间内吸入60%氧气。麻醉结束后将小鼠随机分为两个部分。第一部分进行行为学检测，每组随机抽取8只小鼠，从麻醉后24h开始，进行持续6天的Morris水迷宫行为学观察，观察转APP基因小鼠学习和记忆功能的变化。第二部分进行生化及组织学检测，将剩余的转APP基因小鼠（每组12只）在麻醉结束后6h和24h断颈取脑，分离出海马，制作海马组织切片，应用TUNEL方法观测各组小鼠海马组织CA1区的神经元凋亡。提取海马组织总蛋白，应用ELISA法测定其Aβ含量，应用Western-blot法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3基因的表达量变化。 结果： 第一部分，吸入麻醉药异氟醚对转APP基因小鼠的行为学影响及海藻糖对小鼠学习记忆功能的保护作用。Morris水迷宫测试结果：在定位航行实验中，第1天至第4天，Iso组转APP基因小鼠的逃避潜伏期与Control组相比明显延长（p0.01）；Iso+Tre组转APP基因小鼠的逃避潜伏期与Iso组相比较显著缩短（p0.05）；Iso+Tre组转APP基因小鼠与Control组相比较，逃避潜伏期无明显差异（p0.05）。第5天3组转APP基因小鼠间逃避潜伏期均无明显差异（p0.05）。第6天进行空间探索实验，Iso组的小鼠其空间探索时间比Control组小鼠明显缩短（p0.01），Iso+Tre组与Iso组相比较，，小鼠的空间探索时间明显延长（p0.01），Iso+Tre组与对照组相比，小鼠在原平台所在区域滞留的时间也有缩短的趋向，但并没有显著的差异（p0.05）。 第二部分，海藻糖对异氟醚诱导转APP基因小鼠海马神经元凋亡和Aβ生成的影响。（1）TUNEL法检测的结果表明，Iso组小鼠海马CA1区的染色阳性细胞数目显著增加，表明神经元有广泛凋亡，神经元凋亡指数明显高于Control组（p0.01），Iso+Tre组神经元凋亡指数比Iso组明显降低（p0.01），但与对照组比较仍有差异（p0.05）。(2) ELISA法检测三组小鼠的海马组织Aβ1-42蛋白含量，Iso组转APP小鼠海马的Aβ1-42含量明显高于Control组（p0.01）；Iso+Tre组与Iso组相比较，Aβ1-42含量明显下降（p0.01），与Control组转APP小鼠的海马Aβ1-42含量无明显差异（p0.05）。（3）Western-blot检测结果显示：Iso组和Iso+Tre组转APP基因小鼠与Control组相比较，海马组织Bax和Caspase-3基因的表达均有显著增强，Bcl-2基因的表达降低，Bax/Bcl-2的比值显著增高（p0.01），Iso+Tre组与Iso组相比，Bax及Caspase-3基因表达显著下降，Bcl-2基因表达增强，Bax/Bcl-2比值显著下降（p0.01）。 结论：异氟醚能明显损害转APP基因小鼠的学习记忆功能，而海藻糖能够阻止吸入麻醉药异氟醚诱导转APP基因小鼠的学习记忆功能损害，麻醉前给予给予海藻糖进行干预，能够拮抗吸入麻醉药异氟醚诱导转APP基因小鼠海马神经元凋亡，减少Aβ的产生，海马组织Bax和Caspase-3基因表达下降，从而抑制线粒体凋亡信号通路的活化。
【关键词】：海藻糖 异氟醚 转APP基因小鼠 学习记忆功能
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 前言4-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-13
• 英汉缩略语名词对照13-15
• 第1章 材料与方法 115-19
• 1.1 实验动物15-16
• 1.1.1 筛选方法15
• 1.1.2 实验分组15-16
• 1.2 主要试剂及仪器16
• 1.3 实验方法16-18
• 1.3.1 转 APP 基因小鼠异氟醚吸入麻醉动物模型的建立16
• 1.3.2 Morris 水迷宫实验16-18
• 1.4 统计学处理18-19
• 第2章 结果 119-21
• 2.1 定位航行实验——平均逃避潜伏期19-20
• 2.2 空间探索实验——原平台所在区域的滞留时间20-21
• 第3章 讨论 121-24
• 3.1 APPswe 转基因小鼠 AD 模型的选择21
• 3.2 Morris 水迷宫与学习记忆功能21-22
• 3.3 吸入麻醉药异氟醚与学习记忆功能22-23
• 3.4 海藻糖与学习记忆功能23-24
• 第4章 结论 124-25
• 第5章 材料与方法 225-32
• 5.1 实验动物25
• 5.2 主要试剂及仪器25-27
• 5.2.1 主要试剂25-27
• 5.2.2 主要仪器27
• 5.3 实验方法27-31
• 5.3.1 转 APP 基因小鼠异氟醚吸入麻醉动物模型的建立27
• 5.3.2 TUNEL 法检测海马神经元凋亡27-29
• 5.3.3 ELISA 法检测海马 Aβ含量29-30
• 5.3.4 Western Blot 法检测凋亡基因的表达30-31
• 5.4 统计学分析31-32
• 第6章 结果 232-37
• 6.1 TUNEL 法检测转 APP 基因小鼠海马 CA1 区神经元凋亡32-33
• 6.2 ELISA 法检测海马 Aβ含量33-34
• 6.3 Wesern Blot 法检测 Bcl-2、Bax、Caspase-3 的表达34-37
• 6.3.1 Bcl-2 蛋白表达34-35
• 6.3.2 Bax 蛋白表达35-36
• 6.3.3 Bax/ Bcl-2 的比值36
• 6.3.4 Caspase-3 蛋白表达36-37
• 第7章 讨论 237-41
• 7.1 海藻糖对异氟醚诱导转 APP 基因小鼠海马神经元凋亡的影响37-41
• 第8章 结论 241-42
• 参考文献42-47
• 附录47-59
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果59-60
• 致谢60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 彭明清;夏佐中;;异氟醚预处理与脑保护作用[J];重庆医学;2007年14期

2 杨渊,张苏明,方思羽,张e

本文编号：502199