黄芪、冬虫夏草对新生鼠肾积水梗阻解除后肾损害恢复的影响

发布时间：2017-07-30 16:00

  本文关键词：黄芪、冬虫夏草对新生鼠肾积水梗阻解除后肾损害恢复的影响

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【摘要】：目的:探讨黄芪、冬虫夏草在新生鼠肾积水梗阻解除后,能否促进肾损害更快、更有效地恢复,以便为临床更好地治疗先天性肾积水患儿,提供可靠的实验及理论依据。方法:1、建立动物模型选取出生后48h内的Wistar鼠96只,随机分为8组,每组12只。随机选择1组行假手术,术后3周再次行假手术后以1.0ml/kg/d生理盐水皮下注射(2次/周),建立对照组;余7组应用腰大肌压迫输尿管上段建立不全梗阻的新生鼠肾积水动物模型,随机选择1组为模型组,其余各组再随机分为干预组1(黄芪低剂量组)、干预组2(黄芪高剂量组)、干预组3(冬虫夏草低剂量组)、干预组4(冬虫夏草高剂量组)、干预组5(黄芪+冬虫夏草低剂量组)、干预组6(黄芪+冬虫夏草高剂量组),并在建立肾积水动物模型后3周,再次行手术解除输尿管不全梗阻,并分别在皮下注射生理盐水(1.0ml/kg/d)、低剂量黄芪注射液(1.0ml/kg/d)、高剂量黄芪注射液(3.0ml/kg/d)、低剂量冬虫夏草提取液(0.5ml/kg/d)、高剂量冬虫夏草提取液(2.0ml/kg/d)、低剂量黄芪注射液(1.0ml/kg/d)+低剂量冬虫夏草提取液(0.5ml/kg/d)、高剂量黄芪注射液(3.0ml/kg/d)+高剂量冬虫夏草提取液(2.0ml/kg/d),2次/周,干预9周后标本取材,处死动物。2、检测指标:采集对照组、模型组、干预组1~6的病肾组织标本,部分制成石蜡标本,部分放-80℃冰箱冻存;并收集病肾尿液,-80℃冰箱冻存、待检。①、石蜡标本切片后行HE染色,观察组织结构的变化;②、石蜡标本切片后,通过免疫组织化学PV法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,应用Image-Pro Plus图像分析软件测量平均光密度值;③、应用蛋白印迹(Western blot)法检测各组病肾组织内胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达情况;④、应用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)技术检测病肾组织内IGF-1 m RNA、TGF-β1 m RNA水平的变化;⑤、用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾盂尿IGF-1、TGF-β1水平。结果:1、实验期间动物的存活情况:Wistar新生小鼠共96只,建立不全梗阻肾积水模型及饲养期间死亡5只(麻醉过深致死1只、术中死亡2只、饲养期间死亡2只),存活91只(94.79%),并根据实验情况适量增补实验动物。2、病肾组织形态学的变化(1)、肉眼观:对照组双侧肾脏大小、形态一致,包膜光滑,肾实质质地均一;模型组病肾增大,肾包膜张力高,肾包膜与实质粘连、不易分离,肾实质薄,肾盂扩张、积水明显;干预组病肾增大,但较模型组病肾小,肾实质稍薄,肾盂扩张、积水。(2)、光镜下病肾组织结构的变化:对照组双侧肾脏肾小球、肾小管发育正常,肾小囊未见扩张;模型组病肾肾小球形态异常,肾小球鲍曼氏囊及肾小管扩张;干预组病肾肾小球形态异常,肾小球鲍曼氏囊轻度扩张,肾小管扩张,但肾小球、肾小管的损害较模型组减轻,随药物剂量的增大、以及联合用药,病肾组织结构的损害程度逐渐减轻。3、病肾组织IGF-1、TGF-β1蛋白及其m RNA表达情况IGF-1蛋白及其m RNA在对照组肾组织中高表达,在模型组病肾组织中低表达,在各干预组病肾组织中均有不同程度的表达,低剂量组较高剂量组、联合用药组表达减低,但明显高于模型组;TGF-β1蛋白及其m RNA在对照组肾组织中低表达,在模型组病肾组织中高表达,在各干预组病肾组织中也有不同程度的表达,低剂量组较高剂量组、联合用药组表达增多,但明显低于模型组。对照组与模型组相比较,差异有统计学意义(P0.05),对照组与各干预组相比较,差异有统计学意义(P0.05),模型组与各干预组相比较,差异有统计学意义(P0.05)。各干预组组间相比较,差异无统计学意义(P0.05);随药物剂量增大、以及联合用药,IGF-1蛋白表达量增高,TGF-β1蛋白表达量减低。4、病肾肾盂尿IGF-1、TGF-β1水平变化对照组肾盂尿IGF-1含量高,模型组病肾尿IGF-1含量低,在各干预组病肾尿IGF-1水平不同程度的表达,低剂量组较高剂量组、联合用药组表达减低,但明显高于模型组;对照组肾盂尿TGF-β1含量低,模型组病肾尿TGF-β1含量高,在各干预组病肾尿TGF-β1也有不同程度的表达,低剂量组较高剂量组、联合用药组表达增多,但明显低于模型组。对照组与模型组间比较,差异有统计学意义(P0.05),对照组与各干预组比较,差异有统计学意义(P0.05),模型组与各干预组比较,差异有统计学意义(P0.05)。各干预组组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1、先天性肾积水在解除梗阻后,应用黄芪、冬虫夏草对其皮下注射表明:黄芪、冬虫夏草可促进肾积水梗阻解除后病肾损害的有效恢复。2、黄芪、冬虫夏草促进肾积水梗阻解除后,病肾损害有效恢复的可能机制是:通过上调病肾组织内IGF-1的表达、和/或下调TGF-β1的表达。
【关键词】：Wistar鼠 肾积水 胰岛素样生长因子-1 转化生长因子-β1
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R726.9
【目录】：

• 中英缩略词对照表4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 前言12-14
• 实验材料14-17
• 实验方法17-26
• 结果26-33
• 讨论33-36
• 结论36-37
• 参考文献37-40
• 综述一40-46
• 参考文献44-46
• 综述（二）46-55
• 参考文献53-55
• 致谢55-56
• 作者简介56

【参考文献】

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1 徐卫强;关超;方文革;谷明利;赵维多;许海斌;郭园园;谢海龙;;后腹腔镜手术治疗小儿泌尿外科疾病的临床疗效分析[J];安徽医学;2012年01期

2 高平;;离断性肾盂成形术在小儿肾积水治疗中的效果观察[J];当代医学;2011年24期

3 陈卫兵;李炳;王寿青;张丰年;夏顺林;刘树立;李龙;;腹腔镜辅助小切口肾盂成形术治疗小婴儿肾盂输尿管连接部梗阻[J];腹腔镜外科杂志;2013年07期

4 牟娜,张庆怡,倪兆慧,童菊芳;黄芪对高糖作用下肾间质成纤维细胞表达HGF的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2002年01期

5 袁继丽,刘成,刘成海;冬虫夏草治疗肾纤维化研究进展[J];中国中西医结合肾病杂志;2004年02期

6 李白恩;康国贵;;黄芪颗粒对儿童单纯性肾病综合征免疫功能的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2007年07期

7 黎刚;程弓;陈泽君;陈浩;;冬虫夏草改善狼疮性肾炎患者免疫功能的临床研究[J];西南军医;2009年03期

8 宗灿华;;冬虫夏草对糖尿病肾病大鼠糖脂代谢紊乱的影响[J];牡丹江医学院学报;2008年03期

9 李建业;郭和清;孙斌;姚志勇;周高标;穆大为;刘红明;李建兴;;经皮腔内顺行球囊扩张结合内切开术治疗肾盂输尿管连接部梗阻[J];现代泌尿外科杂志;2014年03期

10 赵德安,杨达胜,毕凌云,许慧琴,赵营,陈新德;百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾小管上皮-间质转分化的干预作用(英文)[J];实用儿科临床杂志;2005年09期

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本文编号：594980