一重与多重脑震荡大鼠分子影像学与脑组织髓鞘动态变化研究

发布时间：2017-08-02 23:15

  本文关键词：一重与多重脑震荡大鼠分子影像学与脑组织髓鞘动态变化研究

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【摘要】：第一部分一重、二重、三重脑震荡大鼠伤后1月与6个月MRS和DTI变化研究[目的]：对损伤后1m和6m的PCC、2MCC、3MCC大鼠进行磁共振波谱(magnetic resonance spectrum, MRS)和弥散张量成像(diffusion tensor imaging, DTI)检测,并对中文结果进行分析。[方法]：(1)动物分组：健康成年SD雄性大鼠64只,体重270±20g,随机分为正常组、PCC模型组、2MCC模型组、3MCC模型组,各模型组再随机分为1月(1m)和6个月(6m)2个处杀点。(2)应用金属单摆打击装置,分批次进行模型复制,复制PCC大鼠模型16只、2MCC模型16只、3MCC模型16只,每次复制成功后随机将大鼠分配到各实验组,实验组包括1m-PCC组、1m-2MCC组、lm-3MCC组、6m-PCC组、6m-2MCC组、6m-3MCC组；对照组包括1m-N组和6m-N。应用美国GE公司的Signa HDxt 3.0T超导型磁共振成像仪,动物专用线圈,定时对脑震荡大鼠腹腔注射麻醉后,将大鼠俯卧位置于圆柱形磁共振专用动物线圈内,放置于MRI扫描床分别行MRS和DTI检测。[结果]：(1)MRS结果：在中隔冠状断面、海马冠状断面、脑干冠状断面,NAA值、NAA/Cr值：与1m-N组相比较,lm-PCC组、1m-2MCC、1m-3MCC组均呈显著下降趋势。1m-2MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与1m-PCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05；1m-3MCC组与1m-2MCC组相比较,差异无统计学意义。与6m-N组相比较,6m-PCC组、6m-2MCC组、6m-3MCC组呈较明显下降趋势。6m-2MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-PCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05; 6m-3MCC组与6m-2MCC组相比较,差异无统计学意义。6m-N组与lm-N组、6m-PCC组与1m-PCC组、6m-2MCC组与1m-2MCC组、6m-3MCC组与1m-3MCC组比较,NAA值呈显著上升趋势,差异有统计学意义,P0.05。Cr值未出现明显变化趋势。Cho值、Cho/Cr值：与lm-N组相比较,1m-PCC组、1m-2MCC、1m-3MCC组均呈显著升高趋势。1m-2MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与1m-2MCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05。与6m-N组相比较,6m-PCC组、6m-2MCC组、6m-3MCC组呈轻度升高趋势。6m-2MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-2MCC组相比较,差异无统计学意义。6m-N组与lm-N组、6m-PCC组与lm-PCC组、6m-2MCC组与1m-2MCC组比较,Cho值呈显著上升趋势,差异有统计学意义,P0.05。 6m-3MCC组与1m-3MCC组比较,Cho值呈显著下降趋势,差异有统计学意义,P0.05。LL值、MI值：与lm-N组相比较,1m-PCC组、1m-2MCC、1m-3MCC组均呈显著升高趋势。1m-2MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与1m-2MCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05。与6m-N组相比较,6m-PCC组、6m-2MCC组、6m-3MCC组呈较明显升高趋势。t6m-2MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-2MCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05。6m-N组与lm-N组、6m-PCC组与1m-PCC组比较,差异无统计学意义。6m-2MCC组与1m-2MCC组、6m-3MCC组与1m-3MCC组比较,LL值呈显著下降趋势,差异有统计学意义,P0.05。(2)DTI结果：FA值、RA值：与lm-N组相比较,1m-PCC组、1m-2MCC、 lm-3MCC组均呈较显著下降趋势。1m-2MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与1m-PCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05；lm-3MCC组与lm-2MCC组相比较,差异无统计学意义。与6m-N组相比较,6m-PCC组、6m-2MCC组、6m-3MCC组呈较显著下降趋势。6m-2MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-2MCC组相比较,差异无统计学意义。6m-N组与lm-N组、6m-PCC组与1m-PCC组相比较,差异无统计学意义：6m-2MCC组与1m-2MCC组、6m-3MCC组与1m-3MCC组比较,FA值呈轻度升高趋势,差异无统计学意义。ADC值：与lm-N组相比较,1m-PCC组、1m-2MCC、1m-3MCC组呈较显著升高趋势。1m-2MCC组与1m-PCC组、1m-3MCC组与lm-PCC组相比较,差异有统计学意义,P0.05; lm-3MCC组与1m-2MCC组相比较,差异无统计学意义。与6m-N组相比较,6m-PCC组、6m-2MCC、6m-3MCC组均无显著变化趋势。6m-2MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-PCC组、6m-3MCC组与6m-2MCC组相比较,差异无统计学意义。6m-N组与1m-N组、6m-PCC组与1m-PCC组、6m-2MCC组与1m-2MCC组,6m-3MCC组与1m-3MCC组比较,差异无统计学意义。[结论]：1.影像学MRS和DTI技术可敏感的检测脑震荡大鼠分子影像学与白质纤维的动态变化。2.MRS可敏感检测PCC、2MCC、3MCC大鼠脑组织代谢功能情况；伤后6个月的损害变化较伤后1个月有显著的改善。3.DTI可敏感检测PCC、2MCC、3MCC大鼠白质纤维束受损状态和血管性水肿改变,且损伤次数越多改变越明显：伤后6个月的损害变化较伤后1个月未发现显著的改善。第二部分 一重、二重、三重脑震荡大鼠伤后1月与6个月髓鞘和MBP变化研究[目的]：观察并分别比较上述不同损伤组之间脑组织脱髓鞘和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的变化,以进一步了解大鼠不同脑震荡后髓鞘动态变化。[方法]：分别用固绿组织化学染色和抗MBP抗体免疫组化S-P法,检测大鼠中隔冠状断面、海马区冠状断面和脑干矢状断面的不同脑区的脱髓鞘变化和MBP表达,采用图像分析系统对上述脑区的脱髓鞘情况和MBP阳性反应物光密度值进行测定分析。[结果]：(1)固绿染色脑组织脱髓鞘结果：在中隔冠状断面胼胝体、海马冠状断面胼胝体、脑干冠状断面锥体束,在观测时间点的髓鞘阳性表达物均减少,各部位伤后各个时间点髓鞘阳性表达物与正常对照组相比均有减少,且均有统计学意义,P0.05；各个部位在PCC、2MCC和3MCC伤后,各个部位的各个时间点PCC、2MCC与3MCC三组间相比较,均有统计学意义,P0.05。伤后3m-N与1m-N、6m-N与1m-N、3m-N与6m-N,髓鞘阳性表达物光密度值差异有统计学意义,P0.05。髓鞘阳性表达物光密度值差异有统计学意义,P0.05。3M-PCC与1M-PCC组、3M-2MCC与1M-2MCC组、3M-3MCC与1M-3MCC组,髓鞘阳性表达物光密度值轻度升高,差异无统计学意义,P0.05。6M-PCC与1M-PCC组、3M-PCC组,6M-2MCC与1M-2MCC组、3M-2MCC组,6M-3MCC与1M-3MCC组、3M-3MCC组,髓鞘阳性表达物光密度值均升高,差异有统计学意义,P0.05。(2)MBP阳性表达物光密度值结果：在中隔冠状断面胼胝体、海马冠状断面胼胝体、脑干冠状断面锥体束,在观测时间点的MBP阳性表达物减少趋势一致,各部位伤后各个时间点MBP阳性表达物与正常对照组相比均有减少,且均有统计学意义,P0.05：各个部位在PCC、2MCC和3MCC伤后,各个部位的各个时间点PCC、2MCC与3MCC三组间相比较,均有统计学意义,P0.05。伤后3m-N与1m-N、6m-N与lm-N、3m-N与6m-N, MBP阳性表达物光密度值差异有统计学意义,P0.05。MBP阳性表达物光密度值差异有统计学意义,P0.05。3M-PCC与1M-PCC组、3M-2MCC与1M-2MCC组、3M-3MCC与1M-3MCC组,MBP阳性表达物光密度值轻度升高,差异无统计学意义,P0.05。6M-PCC与1M-PCC组、3M-PCC组,6M-2MCC与1M-2MCC组、3M-2MCC组,6M-3MCC与1M-3MCC组、3M-3MCC组,MBP阳性表达物光密度值均升高,差异有统计学意义,P0.05。[结论]：(1)不同类型的脑震荡后脑组织脱髓鞘表达呈不同程度上升,且以伤后1个月表达更高；脱髓鞘表达与损伤次数呈正相关。(2) PCC、2MCC和3MCC三种损伤类型,MBP阳性反应物光密度值表达出现不同程度的下降,均以伤后1M表达最低,提示少突胶质细胞MBP损伤严重程度：3MCC2MCC PCC正常组。(3)在PCC、2MCC和3MCC三种损伤类型中3MCC损伤程度最重,损伤累积效应最明显。
【关键词】：PCC MCC MPS DTI PCC MCC OL 脱髓鞘 MBP
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：D919
【目录】：

• 英文缩写及中英文对照5-7
• 中文摘要7-11
• 英文摘要11-16
• 第一部分 一重、二重、三重脑震荡大鼠伤后1月与6个月MRS和DTI变化研究16-57
• 前言16-18
• 材料与方法18-21
• 结果21-45
• 讨论45-52
• 结论52-53
• 展望53-54
• 参考文献54-57
• 第二部分 一重、二重、三重脑震荡大鼠伤后1月与6个月髓鞘和MBP变化研究57-92
• 前言57-59
• 材料与方法59-66
• 结果66-84
• 讨论84-87
• 结沦87-88
• 展望88-89
• 参考文献89-92
• 综述92-96
• 参考文献94-96
• 攻读学位期间获得学术成果96-97
• 致谢97

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