能量平衡状态下不同膳食脂肪摄入对大鼠肥胖相关指标的影响

发布时间：2017-08-13 06:42

  本文关键词：能量平衡状态下不同膳食脂肪摄入对大鼠肥胖相关指标的影响

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【摘要】：目的为全面探讨能量平衡状态下不同膳食脂肪摄入对大鼠肥胖相关指标的影响,本文通过限食实验以及半限食实验两部分喂养实验,观察评价不同膳食脂肪供能比对大鼠血糖、血脂、血压、体脂含量以及相关能量调节因子的影响,为科学指导合理膳食及对肥胖等慢病的防控提供依据和参考。方法1.限食实验将40只雄性SD大鼠按体重及体重增长随机分为4组,每组10只,分别饲喂等能量的低脂、普通、中脂、高脂4种饲料,按照预实验结果,每两天给一次定量饲料,并称体重,使其保持能量平衡,根据体重适当调整给食量,控制体重基本不变。在第0、5、10周测血压1次；在第0、5、10周采尾血,测空腹血糖、血脂、游离脂肪酸和胰岛素；取第0、10周血测血脂联素、瘦素、LBP、Ghrelin、Obestatin。实验结束后麻醉处死动物,取肾周及睾周脂肪称重,计算体脂含量,同时取胃组织,提取脂肪组织和胃组织中总mRNA,并反转录成cDNA,用realtime PCR方法方法检测脂肪组织中脂联素、瘦素、LBP、胃组织中Ghrelin、Obestatin的表达水平。2.半限食实验将40只雄性SD大鼠按体重及体重增长分为10个区组。每个区组的4只大鼠随机分配进入4个处理组,分别饲喂低脂、普通、中脂、高脂4种饲料。其中低脂组大鼠自由摄食,其他三组根据每区组内低脂组大鼠的摄食量,换算出等能量相应普通、中脂、高脂饲料的重量,每两天给一次定量饲料。在第0、5、10周测血压1次；在第0、5、10周采尾血,测空腹血糖、血脂、游离脂肪酸和胰岛素；取第0、10周血测血脂联素、瘦素、LBP、Ghrelin、Obestatin,同时无菌取各组动物粪便,提取肠道菌的基因组DNA, PCR扩增,变性梯度凝胶电泳(DGGE)分离16SrDNA,并将主要条带进行测序,定性、定量分析肠道菌群的分布情况。实验结束后麻醉处死动物,取肾周及睾周脂肪称重,计算体脂含量,同时取胃组织,提取脂肪组织和胃组织中总mRNA,并反转录成cDNA,用realtime PCR方法方法检测脂肪组织中瘦素、脂联素、LBP、胃组织中Ghrelin、 Obestatin的表达水平。结果1.限食实验喂养5周及10周后,大鼠血清中甘油三酯含量中脂组和高脂组显著低于低脂组和普通组；10周末,中脂组脂肪中脂联素mRNA的表达水平显著低于低脂组；胃组织中Ghrelin mRNA高脂组、中脂组与低脂组相比,表达量均明显增加；各组大鼠体脂、血糖、游离脂肪酸、胰岛素、瘦素、脂联素、Ghrelin、Obestatin、 LBP水平均无显著性差异。2.半限食实验喂养5周及10周后,中脂、高脂组与低脂、普通组相比,大鼠血糖水平明显升高,血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白水平明显降低。各组大鼠体重、Lee's index、体脂、血糖、低密度脂蛋白、游离脂肪酸、胰岛素、脂联素、瘦素、Ghrelin、Obestatin、LBP水平均无显著性差异。第0周、10周大鼠粪便总DNA的DGGE电泳图谱显示,每条泳道优势条带的数量、位置及灰度总体上无显著性差异。粪便样品DGGE图谱UPGMA聚类分析结果显示,第0周时各组间总体相似性较高,均在74%以上；第10周各处理组间存在交叉,区组间有一定差异,区组内相似性较高,总体相似性在57%以上。结论1.在能量平衡状态下,不同的膳食脂肪摄入量对大鼠体脂、血糖、游离脂肪酸、胰岛素、瘦素、脂联素、Ghrelin、Obestatin、LBP水平均无影响,高脂肪含量饮食具有有一定的降低血甘油三酯、脂肪组织中脂联素mRNA表达以及提高胃组织中Ghrelin表达的能力。2.在以低脂组自由摄食量为参照的等能量摄入条件下,不同的膳食脂肪摄入量对大鼠体重、Lee's index、体脂、血清胰岛素、瘦素、脂联素、Ghrelin、Obestatin、LBP水平均无影响,高脂肪含量饮食可以升高血糖及降低HDL-C水平,同时具有一定的降低血清中游离脂肪酸以及胆固醇含量的作用。3.不同能量摄入对大鼠肠道菌群分布有一定影响。在等能量摄入条件下,不同膳食脂肪供能比对大鼠肠道菌群的影响无显著差别。
【关键词】：能量平衡 膳食脂肪 体脂 血脂 粪便菌群
【学位授予单位】：中国疾病预防控制中心
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R589.2
【目录】：

• 摘要7-10
• Abstract10-13
• 英文缩略词13-14
• 前言14-19
• 第一章 限食实验19-37
• 1. 材料与方法19-26
• 1.1 材料19-21
• 1.2 方法21-26
• 1.3 统计学处理26
• 2. 结果26-33
• 2.1 大鼠一般情况26-27
• 2.2 大鼠体脂比27
• 2.3 血压测定结果27-28
• 2.4 血糖、血脂测定结果28-29
• 2.5 血清游离脂肪酸水平29
• 2.6 血清胰岛素水平29
• 2.7 血清瘦素、脂联素水平29-30
• 2.8 血清Ghrelin、Obestatin水平30
• 2.9 血清LBP水平30-31
• 2.10 脂肪组织中瘦素和脂联素mRNA的表达水平31-32
• 2.11 胃组织中Ghrelin、Obestatin受体mRNA表达水平32-33
• 3. 讨论33-37
• 第二章 半限食实验37-73
• 第一节 等能量摄入条件下不同膳食脂肪摄入对大鼠基本情况及能量调节因子的影响37-53
• 1. 材料与方法37-41
• 1.1 材料37-39
• 1.2 方法39-41
• 1.3 统计学处理41
• 2. 结果41-49
• 2.1 大鼠一般情况、体重、进食量、能量摄入及Lee's index变化情况41-44
• 2.2 大鼠体脂比44
• 2.3 血压测定结果44-45
• 2.4 血糖、血脂测定结果45-46
• 2.5 血清游离脂肪酸水平46
• 2.6 血清胰岛素水平46-47
• 2.7 血清瘦素、脂联素水平47
• 2.8 血清Ghrelin、Obestatin水平47-48
• 2.9 血清LBP水平48
• 2.10 脂肪组织中瘦素和脂联素mRNA的表达水平48-49
• 2.11 胃组织中Ghrelin、Obestatin受体mRNA表达水平49
• 3. 讨论49-53
• 第二节 等能量摄入条件下不同膳食脂肪摄入对大鼠肠道菌群的影响53-73
• 1. 材料与方法53-57
• 1.1 样品的采集53
• 1.2 粪便总DNA提取53-54
• 1.3 细菌16SrDNAV3区片段的PCR扩增54-55
• 1.4 变性梯度凝胶电泳55-56
• 1.5 DGGE图谱分析56
• 1.6 优势条带克隆与测序分析56-57
• 1.7 统计学处理57
• 2. 结果57-65
• 2.1 粪便菌群16SrDNA V3区片段的PCR扩增结果57-58
• 2.2 DGGE电泳结果及图谱分析58-63
• 2.3 多样性分析63
• 2.4 聚类分析63-64
• 2.5 DGGE条带对比和测序结果分析64-65
• 3. 讨论65-73
• 全文小结73-75
• 致谢75-76
• 参考文献76-81
• 综述81-88
• 参考文献86-88
• 发表文章88-94
• 个人简历94-95
• 附录95

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