miR-223在肾透明细胞癌中的表达和作用

发布时间：2017-10-20 03:08

  本文关键词：miR-223在肾透明细胞癌中的表达和作用

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【摘要】：目的：microRNAs(miRNAs)是一类碱基长度约22个碱基的非编码小RNA。随着miRNA 6的研究进展,越来越多证据表明,这类不编码蛋白的小RNA通过转录后调控等机制,不同程度地参与了肿瘤的发生和发展。近年来的研究发现miR-223在感染、炎症和肿瘤中起着重要的作用。在肿瘤研究中发现,miR-223和白血病,肝细胞肿瘤,食管癌等肿瘤的发生发展有着密切的关系,但是其在肾透明细胞癌中的表达及作用目前尚未有报道。本研究主要探讨miR-223在肾透明细胞癌组织和其瘤旁组织中的表达,并分析病人临床资料及相关性。同时在肾透明细胞癌细胞系中上调miRNA,研究其对肿瘤的增殖与侵袭能力的影响,分析miR-223在肾透明细胞癌发生与发展中的作用,为临床诊断和治疗寻找新的方向。方法：①采用实时定量聚合酶链式反应(real-time RT-PCR)法检测miR-223在肾透明细胞癌组织和瘤旁组织中的表达,并通过SPSS统计软件分析所选病例临床数据与miR-223表达量的关系。同时检测肾透明细胞癌细胞系786-0、Caki-1、Sn12-pm6、ACHN以及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中mR-223的表达量。②通过人工脂质体瞬时转染法,采用miR-223模拟物转及对照无意义序列分别转染肾透明细胞癌细胞系786-0。③通过transwell迁移实验和划痕实验检测转染miR-223模拟物后的786-0细胞的迁徙能力的变化,采用MTS法检测其增殖情况的变化,并通过流失细胞仪分析其细胞周期的变化。结果：①miR-223在肾透明细胞癌组织和肾透明细胞癌细胞系中的表达量明显高于瘤旁组织(P=0.0003)和正常肾小管上皮细胞,分析病例的临床数据显示miR-223的表达量与肿瘤的大小有关,肿瘤直径大于4cm的肿瘤miR-223表达量升高(P=0,0028)。②在transwell迁移实验中,转染miR-223模拟物的786-0细胞迁移的细胞数量比转染无意义序列的对照组迁移数多(P0.0001),划痕实验显示转染miR-223模拟物的786-0细胞愈合能力比转染无意义序列的对照组快,增殖实验表明转染miR-223模拟物的786-0细胞增殖速度快于转染无意义序列的对照组(P=0.006),细胞周期显示转染miR-223模拟物的786-0细胞G1期细胞数减少,S期细胞增加,提示处于增殖的细胞数多(p0.05)。结论：①miR-223的异常表达可能与肾透明细胞癌发生发展有关。②上调miR-223的表达可促进肾透明细胞癌细胞株的增殖和迁移能力。③上调miR-223的表达可以促进细胞从细胞周期的G1期向S期进展进而影响细胞的增殖能力。
【关键词】：miR-223 肾癌 迁移 增殖
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.11
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 第一部分 miR-223在肾透明细胞癌组织及细胞系中的表达及与临床质料的相关性11-19
• 1. 材料与方法11-15
• 2. 结果15-18
• 3. 小结18-19
• 第二部分 miR-223可促进肾透明细胞癌细胞的迁移能力19-24
• 1. 材料与方法19-21
• 2. 结果21-23
• 3. 小结23-24
• 第三部分 miR-223可促进肾透明细胞癌细胞的增殖能力24-29
• 1. 材料与方法24-26
• 2. 结果26-27
• 3. 小结27-29
• 讨论及结论29-32
• 参考文献32-34
• 综述：miR-223在肿瘤中的生物学功能和作用34-42
• 参考文献39-42
• 英文略缩词表42-43
• 攻读学位期间发表论文43-44
• 致谢44-45

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