大鼠草酸钙结石的性别差异及其与骨桥蛋白的相关性研究
本文关键词:大鼠草酸钙结石的性别差异及其与骨桥蛋白的相关性研究
【摘要】:目的:研究雌雄性别差异对乙二醇结石大鼠模型肾脏组织中结石形成的影响及其与骨桥蛋白(OPN)表达的相关性,探讨性别差异导致肾结石的可能机制。方法:选取健康成年SD大鼠24只(雌雄各12只)随机分为生理盐水组(雌雄各6只),乙二醇模型组(雌雄各6只)。生理盐水组给予生理盐水喂养,乙二醇组给予1%的乙二醇溶液,共喂养4周后麻醉处死取出各组大鼠的左右肾脏;左侧肾脏经HE染色及免疫组化后采用偏光显微镜分别观察各组雌雄型大鼠肾小管管腔内的结晶的情况并对结石晶体进行评分及OPN的表达;右侧肾脏采用Western blot法检测各组雌雄型OPN的表达水平。结果:1、通过HE染色显示,正常雌、雄对照组大鼠的肾脏肾小球及肾小管组织的形态结构正常,且肾小管腔内均未发现异常改变;雌性乙二醇大鼠的肾组织中一部分肾小管管腔内可见广泛不成堆、散在的结晶;而在雄性乙二醇大鼠肾组织中大部分肾小管管腔内弥漫、散在分布着无色透明、不规则的片状结晶,且皮质多于髓质,主要散布于近曲小管和远曲小管。2、乙二醇雌性组大鼠的结石结晶评分较乙二醇雄性组低,差异有统计学意义(P0.05)。3、免疫组化和Western blot检测结果显示乙二醇雄性组肾组织中OPN的表达水平高于乙二醇雌性组,且有明显统计学差异(P0.05)。结论:性别差异可影响肾脏结石形成,且雄性较雌性更易形成结石,其机制可能与OPN有关。
【关键词】:骨桥蛋白 草酸钙 肾小管上皮细胞 尿路结石
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R692.4
【目录】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-7
- 缩略词表7-8
- 第1章 引言8-10
- 第2章 材料与方法10-16
- 2.1 实验动物来源10
- 2.2 主要试剂10-11
- 2.3 主要仪器11
- 2.4 大鼠分组及模型的构建11
- 2.5 实验结束前 24h尿液收集及尿钙检测11-12
- 2.6 大鼠肾脏组织标本的获取12
- 2.7 肾脏组织切片及HE染色12
- 2.8 肾脏组织免疫组化12-13
- 2.9 肾小管管腔内草酸钙结石结晶情况的评价标准13
- 2.10 大鼠肾OPN表达分级标准13-14
- 2.11 Western-blotting检测骨桥蛋白的表达14-15
- 2.11.1 提取组织蛋白14
- 2.11.2 采用BCA法测定样品蛋白含量14
- 2.11.3 Western-blotting的操作步骤14-15
- 2.12 统计学分析15-16
- 第3章 结果16-22
- 3.1 实验后观察大鼠的一般情况16
- 3.2 大鼠尿量及尿钙水平的对比16
- 3.3 形态学及镜下观察16-18
- 3.4 免疫组化结果18-20
- 3.5 大鼠肾组织OPN蛋白的水平20-22
- 第4章 讨论22-26
- 第5章 结论与展望26-27
- 5.1 结论26
- 5.2 不足之处与展望26-27
- 致谢27-28
- 参考文献28-31
- 攻读学位期间的研究成果31-32
- 综述 骨桥蛋白参与尿路结石形成的机制32-36
- 参考文献35-36
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