慢病毒介导shRNA沉默YAP基因对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡及其雄激素受体的影响

发布时间：2017-10-25 13:07

  本文关键词：慢病毒介导shRNA沉默YAP基因对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡及其雄激素受体的影响

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【摘要】：目的:探讨慢病毒介导sh RNA沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因对人激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞增殖、凋亡及其雄激素受体(androgen receptor,AR)的影响。方法:3条针对YAP基因的sh RNA慢病毒干扰载体感染LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后建立稳定感染细胞系,real-time PCR、Western blot分别检测感染后各组细胞YAP、AR m RNA和蛋白水平;选取沉默效果最佳sh RNA慢病毒干扰载体组,以细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成实验(colony formation)检测LNCa P细胞增殖能力;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测LNCa P细胞凋亡改变。结果:重组慢病毒成功感染前列腺癌LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后感染效率达95%以上,获得稳定沉默YAP基因LNCa P细胞系。与空白对照组和阴性对照组比较,感染sh RNA慢病毒干扰载体各组中YAP、AR m RNA及蛋白表达水平明显下调(P=0.000),细胞增殖受到明显抑制(P=0.000),细胞凋亡明显增加(P=0.000)。结论:慢病毒介导sh RNA沉默YAP基因能有效下调YAP在LNCa P细胞中表达,并抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡;YAP可能作为AR配体参与AR信号通路的调节。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科;重庆医科大学附属大学城医院消化神经中心;重庆医科大学附属第一医院;綦江区人民医院泌尿外科;
【关键词】： 前列腺癌 雄激素受体 Yes-相关蛋白 慢病毒
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:30972999) 重庆市自然科学基金资助项目(编号:cqpc2012jja1698) 重庆市卫生局基金资助项目(编号:2013-2-082) 重庆市卫生和计划生育委员会基金资助项目(编号:20143061)
【分类号】：R737.25
【正文快照】： 3.重庆医科大学附属第一医院綦江区人民医院泌尿外科,重庆401420)前列腺癌(prostate cancer,PCa)在欧美国家为除肺癌外男性最常见恶性肿瘤,国际癌症研究机构数据显示其发病率和死亡率呈持续升高[1]。随着我国人口老龄化进程加剧及饮食结构改变,我国前列腺癌发病率也逐渐增加[2

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张红珠;张翠萍;张琪;魏文超;田字彬;;MST1与YAP1在食管疾病中的表达及意义[J];青岛大学医学院学报;2014年01期

2 王芳芳;潘洁雪;任s，

本文编号：1093837