肥大细胞及大麻素CB2受体与大鼠间质性膀胱炎的相关性研究

发布时间：2017-11-03 14:24

  本文关键词：肥大细胞及大麻素CB2受体与大鼠间质性膀胱炎的相关性研究

  更多相关文章： 间质性膀胱炎 MC 大麻素CB2受体 JWHO15

【摘要】：目的：本实验通过建立间质性膀胱炎(IC)动物模型,检测肥大细胞(MC)及大麻素CB2受体在IC模型中的表达情况,以及大麻素CB2受体激动剂JWH015处理后的IC模型上的表达情况,探讨MC与CB2受体在IC的关系,进而为IC的治疗寻求新靶点。分组及方法：1. 分组：选用SPF级雌性SD大鼠30只,随机分成3组A空白组：10只,B IC组：10只,C IC干预组。2.方法：(1)空白组经尿道膀胱灌注0.9%的生理盐水1 ml,保留45]min,排尽药物后用磷酸缓冲液(PBS)冲洗3次,不做特殊处理,连续1周。(2)IC组经尿道膀胱灌注10mg/ml的硫酸鱼精蛋白1 ml,保留45 min,排尽药物后用磷酸缓冲液(PBS)冲洗3次；灌注750ug/ml的脂多糖1 ml,保留30 min,排尽药物后用PBS冲洗3次,拔出导管,不做特殊处理,连续1周。(3)IC干预组经尿道膀胱灌注10 mg/ml的硫酸鱼精蛋白1 ml,保留45 min,排尽药物后用磷酸缓冲液(PBS)冲洗3次；灌注750ug/ml的脂多糖1 ml,保留30 min,排尽药物后用PBS冲洗3次,拔出导管,4h后腹腔注射05mg/m (?)大麻素受体激动剂CB2激动剂]fWHO15(5mgJWHO15溶于10m120%的二甲亚砜中)2ml,每天一次连续1周。一周后立即处死三组大鼠取膀胱组织,并进行一下操作：(1)通过HE染色观察研究对象IC动物模型病理学特征；(2)甲苯胺蓝染色检测大鼠膀胱MC的数量；(3)免疫组化双染色计算大麻素CB2阳性细胞及相对表达量；(4) Western-bolt检测三组大鼠膀胱粘膜大麻素CB2受体的表达。结果：1、空白组膀胱见粘膜及粘膜下层完好无损,见少量炎细胞浸润。IC组及IC干预组可见膀胱粘膜损伤明显,粘膜层出现连续性破坏,粘膜下层脱落,膀胱壁组织可见广泛的出血与充血现象。2、MC经甲苯胺蓝染色呈紫红色,空白组大鼠膀胱可见少量MC;IC组膀胱粘膜及粘膜下层可见大量MC表达(P0.01,vs空白组),加入大麻素受体激动剂后,IC干预组大鼠膀胱粘膜上MC表达有所减少,但仍高于空白组(P0.05_vs空白组；P0.05.vs膀胱炎组)。三组大鼠膀胱肌层上MC较少,且无明显差异(P0.05)。3、免疫组化染色可见三组大鼠膀胱粘膜组织均有大麻素CB2受体表达；IC组膀胱粘膜表达明显低于空白组(P0.01,vs空白组),加入大麻素受体激动剂后,IC干预组大鼠膀胱粘膜上大麻素CB2受体达有所升高,但仍低于空白组,高于IC组(P0.0S.vs空白组；P0.05.vs IC组)。4、Western-bolt结果中,三组大鼠膀胱粘膜组织均有大麻素CB2受体表达；间质性膀胱炎组膀胱粘膜表达明显低于空白组(P0.05,vs空白组),加入大麻素受体激动剂JWH015后,干预组大鼠膀胱粘膜上大麻素CB2受体表达有所升高,高于间质性膀胱组,但仍低于空白组(P0.05.vs空白组；P0.05.vs-膀胱炎组)。三组大鼠肌层大麻素CB2受体表达较少,且无明显差异(P0.05)。结论：1.本实验通过经尿道膀胱灌注硫酸鱼精蛋白和脂多糖可以成功构建大鼠间质性膀胱炎(IC)动物模型,符合人类IC病理特征。2.IC组膀胱组织的MC增加明显,且脱颗粒MC明显增加,膀胱肌层可见少量纤维化,由此推测MC与IC的发生及发展炎密切相关。3.IC干预组膀胱组织可见大量MC,但脱颗粒状较少,CB2受体表达升高。表明大麻素CB2受体激动剂可抑制MC的表达,减缓和阻止IC的进展,可能成为治疗IC的新靶点。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R694.3

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