十溴联苯醚上调MAPKs蛋白并损伤血睾屏障的研究

发布时间：2017-11-06 21:42

  本文关键词：十溴联苯醚上调MAPKs蛋白并损伤血睾屏障的研究

  更多相关文章： BDE-209 MAPKs Claudin-11 BTB

【摘要】：目的探索雄性ICR暴露十溴联苯醚(decabromodiphenyl ether,BDE-209)对小鼠睾丸MAPK通路相关蛋白、血睾屏障紧密连接蛋白Claudin-11以及血睾屏障超微结构的影响;此外,还对不同浓度BDE-209染毒处理Ser W3细胞MAPK通路相关蛋白和紧密连接蛋白Claudin-11表达水平影响进行初步研究,为阐明BDE-209的雄性生殖毒性机制提供科学依据。方法体内实验中,4周龄雄性ICR小鼠,52只,体重15~21克,适应性饲养一周,随机分为4组,即溶剂对照组(0 mg/kg BW)、低剂量组(100 mg/kg BW)、中剂量组(300 mg/kg BW)和高剂量组(500 mg/kg BW),每组13只,经灌胃染毒6周后处死,冰浴情况下分离脏器、称重,然后将生物样本保存于-80℃超低温冰箱直至检测。对睾丸组织进行HE染色进行光镜观察以及电镜观察超微结构;Western Blot方法检测小鼠睾丸MAPKs通路中的相关蛋白(p38、p-p38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK)和Claudin-11表达变化;体外实验中,用不同浓度BDE-209(0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml和40μg/ml)处理Ser W3,24h后观察细胞形态变化,MTT方法检测细胞存活百分率、LDH实验检测乳酸脱氢酶毒性、Western Blot方法检测MAPK通路相关蛋白(p38、p-p38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK)和血睾屏障紧密连接蛋白Claudin-11的表达变化。结果BDE-209染毒处理雄性ICR小鼠6周后,发现各剂量组雄性ICR小鼠的体重增加缓慢,从第三周开始,中剂量组和高剂量组小鼠的体重具有统计学差异(P0.05),小鼠睾丸系数和附睾系数显著降低(P0.05)。HE染色发现随着染毒剂量加大,睾丸输精管中的精子数目明显减少,睾丸支持细胞数减少,细胞排列不紧密,支持细胞间间隙增宽,间质细胞间隙明显增宽,生精细胞间隙增大,支持细胞数、生精细胞数以及间质细胞数显著减少。超微结构结果表明,与溶剂对照组相比,剂量组出现明显支持细胞紧密连接解体、断裂。体内外实验均显示,MAPKs通路中p-p38/p38和p-JNK/JNK值显著增加,差异在统计学上有意义(P0.05);以及Claudin-11的表达显著降低(P0.05)。结论BDE-209可以引起睾丸组织和Ser W3细胞中MAPKs通路相关蛋白表达增加、Claudin-11的表达降低,并且引起睾丸组织中支持细胞紧密连接破坏,提示BDE-209可能通过MAPKs通路引起支持细胞BTB损伤。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R697.22

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7 管，

本文编号：1149535