miR-34b抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖

发布时间：2017-11-11 02:11

  本文关键词：miR-34b抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖

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【摘要】：目的:探讨微RNA-34b(microRNA-34b,miR-34b)对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR检测膀胱癌BIU-87细胞、人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1和人肾小管上皮细胞HK-2中miR-34b的表达水平。将miR-34b mimic转染至BIU-87细胞后,应用MTT法和克隆形成实验检测BIU-87细胞的增殖和克隆形成情况。miR-34b mimic与泛素特异肽酶22(ubiquitin-specific peptidase 22,USP22)-野生型(wide type,WT)或USP22-突变型(mutation type,Mut)重组载体共转染后,应用萤光素酶报告系统检测miR-34b是否与USP22基因3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)结合。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测miR-34b mimic转染后,BIU-87细胞中USP22 mRNA和蛋白的表达水平。结果:膀胱癌BIU-87细胞中miR-34b的表达水平低于肾小管上皮细胞HK-2和膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1(P值均0.05)。miR-34b mimic转染后,BIU-87细胞的增殖率和克隆形成率低于空白对照组(BIU-87细胞未进行任何转染)和阴性对照组[BIU-87细胞转染miRNA mimic negative control(miRNA mimic NC)](P值均0.05)。萤光素酶报告系统检测结果显示,miR-34b能特异性地与USP22基因3'-UTR结合,miR-34b mimic与重组载体USP22-WT共转染组细胞的萤光素酶活性下降(P0.05)。miR-34b mimic转染组BIU-87细胞中USP22蛋白的表达水平低于空白对照组和阴性对照组(P值均0.05)。结论:miR-34b可抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖,这一作用可能与USP22的表达有关。
【作者单位】： 武汉市第一医院泌尿外科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81502204)~~
【分类号】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,具有易细胞周期,诱导细胞凋亡[4]。本课题组的前期研复发、易耐药、易侵袭和易转移的生物学特点[1]。究表明,USP22基因在具有化疗耐药、复发及转泛素特异肽酶22(ubiquitin-specific peptidase移的膀胱癌组织中异常高表达,通过si RNA沉默22,USP

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本文编号：1169351