HMGB1对膀胱癌细胞增殖与凋亡的影响

发布时间：2017-11-13 19:20

  本文关键词：HMGB1对膀胱癌细胞增殖与凋亡的影响

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【摘要】：目的：通过检测膀胱癌细胞系(BIU-87、 5637、T24、EJ)及人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)中HMGB1的表达情况,探讨HMGB1对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响及可能的机制。方法：第一部分：内源检测1.利用膀胱癌组织芯片技术,检测人正常膀胱上皮细胞和膀胱癌细胞系(BIU-87、5637、T24、EJ)中HMGB1的表达情况；2.分别使用膀胱癌细胞系(BIU-87、5637、T24、EJ)及人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1),利用实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)检测HMGB1在膀胱癌细胞系(BIU-87、5637、T24、EJ)及人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)中的mRNA表达水平；第二部分：功能建模1.过表达HMGB1,过表达重组质粒转染膀胱癌细胞系BIU-87、T24。2.设计并构建HMGB1靶向敲除质粒对,共转染膀胱癌细胞系BIU-87、T24,分别筛选出稳定的细胞株。3.Western Blot检测细胞模型中HMGB1蛋白的表达水平变化。分组：Con,过表达NC,HMGB1过表达,pTalen NC,pTalen-HMGB1第三部分：功能实验1.MTT检测细胞增殖测定。分组：Con组,乱序siRNA组,HMGB1 siRNA组,NC组,pTalen NC组,pTalen-HMGB1组。2. Transwell检测细胞转移和侵袭。分组：Con,过表达NC,HMGB1过表达,pTalen NC, pTalen-HMGB1。3.流式细胞术检测细胞凋亡。分组：Con,过表达NC,HMGB1过表达,pTalen NC,pTalen-HMGB1。结果：本研究发现,相对于正常人膀胱上皮细胞,膀胱癌细胞系(BIU-87、T24、5637、EJ)中的HMGB1蛋白表达水平显著上调；转染HMGB1 siRNA后的膀胱癌细胞T24、BIU-87生长受到抑制；转染pTalen-HMGB1质粒后膀胱癌细胞T24、BIU-87生长同样受到抑制；转染HMGB1 siRNA后,两株膀胱癌细胞BIU-87、T24侵袭能力减弱；转染pTalen-HMGB1后,两株膀胱癌细胞BIU-87、T24侵袭能力也减弱；转染HMGB1 siRNA细胞凋亡率升高；转染pTalen-HMGB1细胞凋亡率升高,且高于HMGB1 siRNA组(p0.05)。结论：1.HMGB1在膀胱癌细胞中的表达水平高于人正常的膀胱上皮细胞;2.HMGB1敲除／沉默后可抑制膀胱癌细胞增殖和侵袭;3.HMGB1敲除／沉默后可诱导膀胱癌细胞的凋亡；4.HMGB1敲除／沉默后可能通过Bax/Bcl-2途径诱导膀胱癌细胞凋亡；
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.14

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本文编号：1182049