蛋白磷酸酶2A在肾间质纤维化中的作用
本文关键词：蛋白磷酸酶2A在肾间质纤维化中的作用
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【摘要】：目的:探讨蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)在大鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)及TGF-β1刺激的人近端肾小管上皮细胞-2(human kidney proximal tubular epithelial-2,HK-2)的肾纤维化模型中的作用。方法:1)15只雄性SD大鼠随机分成假手术组(sham组)、模型组(UUO组)和UUO+冈田酸(okadaic acid,OA)干预组(OA组),每组各5只。术后OA组每日给予1.8%酒精稀释的OA 30μg/kg,胃管饲喂72 h,对照组和模型组给予相等体积的1.8%酒精胃管饲喂,72 h后处死大鼠,收集血和肾组织,检测肾功能并采用免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR法检测肾组织PP2A的c亚基(PP2Ac)、纤维连接蛋白(fi bronectin,FN)、胶原-I(collagen-I,Col-I)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白及m RNA的表达。2)采用台盼蓝排斥实验及MTT法找出适宜的OA浓度。常规培养HK-2细胞,随机分为对照组、TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/m L干预24 h)、TGF-β1+OA组(TGF-β1 5 ng/m L+OA 40 nmol/L,同时干预24 h),Western印迹检测肾小管上皮细胞PP2Ac,FN,Col-I,E-cad和α-SMA蛋白的表达。结果:1)肾功能表明UUO组尿素氮和肌酐较sham组升高,OA组尿素氮、肌酐均比UUO组下降(均P0.05)。免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR均显示:与sham组比较,UUO组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表达升高,而E-cad表达下降(均P0.05);与UUO组比较,OA组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表达下降,E-cad表达升高(均P0.05);2)OA 40 nmol/L为最适宜的实验质量浓度;Western印迹显示:与对照组比较,TGF-β1组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表达升高,E-cad表达下降(均P0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+OA组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表达下降,E-cad表达升高(均P0.05)。结论:PP2A能促进肾间质纤维化。
【作者单位】： 中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾脏病研究所;长沙市中心医院肾内科;
【基金】：国家自然科学基金(81100486,81370792) 湖南省科技计划项目(2013SK3036) 中华医学会临床医学专项基金(13030400425)~~
【分类号】：R692
【正文快照】： Role of protein phosphatase 2A in renal interstitial fibrosisXI Yiyun1,2,LI Hua1,LI Jun1,LI Ying1,LIU Yuping1,YOU Yanhua1,DUAN Shaobin1,LIU Hong1,SUN Lin1,PENG Youming1,LIU Fuyou1(1.Department of Nephrology,Second Xiangya Hospital;Institute of Nephrology
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