高糖对大鼠肾间质成纤维细胞表达PINCH-1的影响

发布时间：2017-12-26 08:29

  本文关键词：高糖对大鼠肾间质成纤维细胞表达PINCH-1的影响　出处：《川北医学院》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:(1)通过高糖刺激大鼠肾间质成纤维细胞(NRK49F),观察PINCH-1(Particulary interesting new cysteine-histicline rich protein-1)和整合素连接激酶(Integrin-linked kinase,ILK)表达的动态变化,研究PINCH-1的表达对成纤维细胞的活化和表面特异蛋白的影响。(2)探讨PINCH-1和ILK的相互作用。(3)探讨PINCH-1在糖尿病肾病发病中的作用及可能机制。方法:1.体外培养大鼠NRK49F细胞,高糖(25mmol/l葡萄糖)培养6h、12h、24h、48h、72h后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、免疫细胞化学法(Immunocytochemistry,ICC)分别检测各组PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白表达的动态变化,同时做低糖对照(5.5mmol/l葡萄糖)。2.在不同浓度葡萄糖(5.5mmol/l,15mmol/l,25mmol/l)作用于大鼠NRK49F细胞48h后,检测各组PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白的表达。结果:(1)高糖组PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白的表达均呈时间依赖性增加。PINCH-1和ILK的mRNA均在48h达高峰,72h后表达开始下降(P0.05)。PINCH-1蛋白在48h表达最强,ILK蛋白在24h表达最强,差异有统计学意义(P0.05)。(2)不同浓度葡萄糖培养大鼠NRK49F细胞48h后,PINCH-1和ILK的mRNA及蛋白的表达均呈浓度依赖性增加,高糖组PINCH-1mRNA(25mmol/l)是低糖组(5.5mmol/l)的(1.978±0.091)倍,高糖组ILKmRNA是低糖组的(2.344±0.157)倍(P0.01)。高糖组PINCH-1蛋白的表达是低糖组的(1.542±0.217)倍,ILK蛋白的表达是低糖组的(1.491±0.189)倍,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1.高糖能够促进大鼠肾间质成纤维细胞中调节蛋白PINCH-1和ILK的表达。2.PINCH-1可能通过与ILK相互作用,在糖尿病肾病肾间质纤维化的发生发展中发挥了重要的作用,PINCH-1可能成为未来糖尿病肾病治疗的新靶点。
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R692.9

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本文编号：1336551