CXCL16基因沉默减轻ox-LDL对小鼠足细胞损伤

发布时间：2017-12-31 10:18

  本文关键词：CXCL16基因沉默减轻ox-LDL对小鼠足细胞损伤　出处：《山东大学学报(医学版)》2016年06期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的探讨CXC趋化因子配体16(CXCL16)基因沉默在减轻氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对足细胞损伤中的作用。方法小鼠CXCL16基因短发卡RNA(shRNA)慢病毒及阴性对照慢病毒转染足细胞,Real-time PCR、Western blotting检测转染效率。CCK8法检测转染后足细胞活力。将转染后足细胞分为4组培养和处理,即阴性对照组(NC组)、ox-LDL组、CXCL16-shRNA组、ox-LDL+CXCL16-shRNA组。总胆固醇含量测定估计细胞内脂质沉积,Western blotting检测CXCL16及β1整合素变化,并检测活性氧(ROS)的表达。结果 CXCL16-shRNA慢病毒转染后,CXCL16 mRNA抑制率约70%(P=0.008),CXCL16蛋白抑制率约60%(P=0.008)。CXCL16-shRNA组及NC组细胞活力差异无统计学意义(P=0.712)。ox-LDL+CXCL16-shRNA组较ox-LDL组细胞内脂质沉积减少(P0.001),β1整合素表达量增加(P=0.004),ROS产生减少(P0.001)。结论 CXCL16基因沉默可减少ox-LDL作用后ROS表达量,并增加β1整合素的表达,发挥足细胞保护作用。
[Abstract]:Objective to investigate the role of CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) gene silencing in reducing oxidative low density lipoprotein (ox-LDL). Methods Lentivirus of mouse CXCL16 gene short hairpin RNAs and negative control lentivirus were transfected into podocytes. Real-time PCR Western blotting was used to detect the transfection efficiency. CCK8 method was used to detect the viability of podocytes after transfection. The podocytes were divided into 4 groups for culture and treatment. CXCL16-shRNA group, the negative control group (NC group) and ox-LDL group (P < 0.05). Ox-LDL CXCL16-shRNA group. Total cholesterol content was measured to estimate intracellular lipid deposition. Western blotting was used to detect the changes of CXCL16 and 尾 1 integrin, and the expression of reactive oxygen species (Ros). Results CXCL16-shRNA lentivirus was transfected. The inhibitory rate of CXCL16 mRNA was about 70%. The inhibitory rate of CXCL16 protein was about 60%. There was no significant difference in cell viability between CXCL16-shRNA group and NC group (P0. 712). The intracellular lipid deposition in ox-LDL CXCL16-shRNA group was significantly lower than that in ox-LDL group (P 0.001). The expression of 尾 1 integrin increased and the Ros production decreased. Conclusion CXCL16 gene silencing can reduce the expression of ROS after ox-LDL treatment. And increase the expression of 尾 1 integrin, play a protective role in podocytes.
【作者单位】： 山东大学附属省立医院小儿肾脏风湿免疫科;山东大学附属省立医院小儿神经科;
【基金】：山东省自然科学基金(ZR2010HM110);山东省自然科学基金(ZR2015HM009) 山东省科技发展计划(2014GGH218009)
【分类号】：R692
【正文快照】： 网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/37.1390.R.20160307.0935.004.html研究表明,氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)对肾脏系膜细胞、内皮细胞、足细胞均可造成损伤。在许多肾小球疾病中,如糖尿病肾病、微小病变性肾病综合征、局灶性节段

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本文编号：1359337