茶多酚增强表柔比星诱导膀胱癌T24细胞凋亡和抑制其自噬的机制
发布时间:2018-03-04 11:52
本文选题:表柔比星(EPI) 切入点:茶多酚 出处:《细胞与分子免疫学杂志》2017年06期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的研究表柔比星(EPI)诱导人膀胱癌T24细胞发生自噬的分子机制,探讨茶多酚(TP)联合EPI对T24细胞的影响及其机制。方法将T24细胞分成对照组、EPI组、TP组、TP联合EPI组。分别处理8 h,用透射电镜观察各组细胞自噬体形成情况,Western blot法检测T24细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、p62水平。处理24 h后,用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blot法检测T24细胞中活化的胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、活化的多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)水平。用自噬通路抑制剂氯喹、3-甲基腺嘌呤联合EPI处理T24细胞8 h,Western blot法检测T24细胞LC3Ⅱ水平,再将TP与c-Jun氨基端激酶(JNK)通路抑制剂SP分别联合EPI处理8 h后,检测2组细胞LC3Ⅱ及磷酸化的JNK(p-JNK)水平。结果 TP联合EPI组T24细胞自噬体数量及LC3Ⅱ含量明显少于EPI组;JNK通路抑制剂SP能显著降低EPI引起的LC3Ⅱ表达,p-JNK水平与EPI呈时间依赖性增强;TP联合EPI能降低JNK通路活性;联合组细胞凋亡率及c-caspase-3和c-PARP蛋白水平明显高于EPI组。结论TP通过抑制JNK通路活性抑制膀胱癌T24细胞自噬并增强其对EPI敏感性。
[Abstract]:Objective to study the molecular mechanism of autophagy induced by epirubicin (EPI) in human bladder cancer T24 cells. To investigate the effect and mechanism of tea polyphenols (TP) combined with EPI on T24 cells. Methods T24 cells were divided into two groups: control group, TP group, TP group and EPI group. After 8 hours of treatment, the formation of autophagy in each group was observed by transmission electron microscope and detected by Western blot. The level of autophagy associated protein microtubule-associated protein light chain 3 鈪,
本文编号:1565536
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