P73和EPSTI1基因单核苷酸多态性与生精障碍关系的初步研究

发布时间：2018-04-15 08:21

本文选题：P73 + EPSTI1　；参考：《大理大学》2017年硕士论文

【摘要】：不育现今已是世界性的问题,是继肿瘤和心脑血管疾病之后困扰人类的第三大难题。在育龄夫妇中的发病率已高达10%~15%,其中男性因素占据50%。导致男性不育的病因很复杂,除内分泌激素紊乱、生殖道炎症、精索静脉曲张、免疫异常、理化等因素外,在男性不育的患者中,生精障碍是最常见的类型之一。研究表明遗传因素在生精障碍的发生过程中发挥重要作用。目前,已发现一些与生精障碍相关的遗传因素,如染色体的畸变,Y染色体微缺失和基因突变等,但这些已知的遗传因素只能解释其中的一小部分病例,还有许多的未知的遗传因素有待进一步明确。精子发生是从精原干细胞发育成高度分化的精子细胞的过程,这一过程受众多基因的调控,其中的任何一个基因发生异变,都可能影响正常的生精过程,从而导致生精障碍。因此,这些基因也被视为影响男性不育的重要候选基因。生精障碍候选基因的研究对阐述男性不育的遗传病因和发病机制有重要意义。P73基因是P53基因家族中的一个重要成员,它与P53基因在结构和功能上都有一定的相似性,都属于转录因子,P73转录活性的丢失或异常与细胞周期的阻滞以及细胞凋亡相关,同时,P73基因剪切的异构体也可以抑制细胞的生长,P73基因过度的表达可以促进细胞凋亡。在近年来的研究中,P73基因与食管癌、胃癌以及宫颈癌等的病发都有一定的关联性;在生殖功能方面,对生殖细胞基因组的完整性以及胚胎的植入,内分泌等都有重要作用,尤其在精子和神经元发育过程中也扮演着重要的角色。在小鼠中的研究表明,P73基因的缺陷可导致生精障碍和雄性不育,提示P73基因对精子生长具有重要作用,它的变异可能与生精障碍和男性不育相关。EPSTI1作为一种干扰素应答基因,最初是人乳腺成纤维细胞通过三维共培养分离出来的,已被鉴定为人乳腺癌细胞的诱导基因。EPSTI1的表达水平与肿瘤发生和迁移、干细胞样性质、上皮间质转化(EMT)和乳腺癌侵袭和转移有关。随后也有研究证实,EPSTI1基因的表达也与细胞凋亡相关。EPSTI1基因在男性睾丸中表达水平也很高。GWAS分析提示,EPSTI1基因内的SNP可能与生精障碍有一定的相关性,也被认为是男性不育的重要候选基因,但是否与男性不育的易感性相关还有待于进一步的研究。目前,由于国内外尚缺乏关于P73基因对男性不育和生精障碍影响的资料。此外,EPSTI1基因与生精障碍的研究资料也比较少。鉴于此,本研究利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)和DNA测序等方法,对P73基因功能性SNP G4C14/A4T14及EPSTI1基因SNP rs12870438、rs61389340和rs1044856与生精障碍的相关性基因调查,初步了解P73基因以及EPSTI1基因的变异与生精障碍的关系,为男性不育和生精障碍遗传病病因学提供一些参考资料。研究结果如下:通过比较严重生精障碍(包括无精症和严重少精症)和正常对照组P73基因G4C14/A4T14等位基因频率和基因型频率的分布,发现严重少精症患者的等位基因AT频率(28.9%vs22.4%,P=0.017,OR=1.41,95%CI=1.07-1.85)显着高于对照组,而基因型GC/GC与对照相比,显著降低(48.5%vs59.1%,P=0.048,OR=0.65,95%CI=0.46-0.91)。对比EPSTI1基因的少精症病例组和正常对照相进行关联分析,EPSTI1基因的三个SNP位点结果如下:(1)SNP rs1389340没有观察到多态性位点;(2)SNP rs1044856位点TA基因型频率分布无明显差异,与男性少精症不相关联;(3)SNP rs12870438位点发现少精症患者的等位基因频率GA(24.4%vs17.2%,P=0.020,OR=0.433,95%CI=0.303-0.621)明显高于正常对照组,而病例组少精症患者的基因型GG与正常对照组相比,显著降低(53.7%vs69.2%,P=0.007,OR=1.563,95%CI=1.070-2.285)。这些结果提示,P73基因G4C14/A4T14的多态性可能与严重生精障碍相关;EPSTI1基因SNP rs12870438的多态性可能与少精症相关。
[Abstract]:P73 gene is one of the most common types of male infertility . The study shows that genetic factors play an important role in the pathogenesis of male infertility . The association gene of P73 gene SNP rs12870438 , rs61389340 and rs1044856 with spermatogenic disorder was investigated by polymerase chain reaction ( PCR ) , restriction fragment length polymorphism ( RFLP ) and DNA sequencing . ( 1 ) SNP rs1389340 did not observe polymorphism sites ; ( 2 ) SNP rs1044856 had no significant difference in frequency distribution of TA genotype ; ( 3 ) SNP rs12870438 allele frequency GA of patients with oligospermia was significantly lower than that in normal control group ( 53.7 % vs 69.2 % , P = 0.007 , OR = 1.563 , 95 % CI = 1.070 - 2.285 ) . These results suggest that the polymorphism of P73 gene G4C14 / A4T14 may be associated with severe spermatogenic disorder , and the polymorphism of SNP rs12870438 may be associated with oligospermia .

【学位授予单位】：大理大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R698.2

【参考文献】