自噬相关基因在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型中的表达及意义

发布时间：2018-04-30 05:44

  本文选题：自噬 + 慢性前列腺炎　； 参考：《安徽医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的通过探索自噬相关基因自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1在慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型中的异常表达及时序变化,探讨自噬在慢性非细菌性前列腺炎中的可能作用。方法(1)取6只300 g左右的雄性SD大鼠,无菌条件下完整剪下前列腺组织,剪刀剪碎后放在玻璃匀浆器中匀浆,匀浆后于冷冻离心机离心,12 000 r/min,4℃,30 min,吸取上清液,BCA法稀释蛋白提纯液至40 g/L;(2)取3月龄雄性SD大鼠40只随机分为正常对照组、2周CNP模型组、4周CNP模型组、6周CNP模型组,每组10只,CNP模型组采用前列腺抗原原位注射法,每只大鼠注射0.2ml前列腺蛋白提纯液,对照组原位注射等量生理盐水;(3)HE染色观察各组前列腺组织炎性细胞浸润情况;(4)采用免疫组化SABC法检测各组前列腺组织中LC3、Beclin-1的表达情况;(5)采用Western blot法检测各组前列腺组织中LC3-Ⅰ/Ⅱ的转化水平和Beclin-1的表达情况;(6)运用SPSS 16.0软件进行统计学分析,计量资料采用(?)±s表示,多组间比较采用One-Way ANOVA分析,两两比较采用S NK-q检验,检验水准α=0.05。结果(1)成功提取前列腺蛋白提纯液至浓度为40 g/L;(2)HE染色结果提示各模型组成功构建大鼠慢性非细菌性前列腺炎,正常对照组未见明显炎症表现。6周模型组炎症浸润情况高于4周模型组和2周模型组;(3)免疫组化法检测显示各实验组LC3、Beclin-1蛋白的表达均高于对照组并随时间的推移表达量逐渐升高,差异有统计学意义(P0.05);(4)Western blot法检测各模型组LC3-Ⅰ/Ⅱ的转化水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。2周模型组和4周模型组LC3-Ⅰ/Ⅱ的转化差异无统计学意义。6周模型组LC3-Ⅰ/Ⅱ的转化水平高于2周模型组和4周模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论通过原位注射前列腺蛋白提纯液能够构建出SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎;自噬相关基因LC3和Beclin-1在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型的发病过程中高表达。
[Abstract]:Objective to explore the possible role of autophagy in chronic nonbacterial prostatitis by exploring the abnormal expression of autophagy microtubule-associated protein 1 (LC3) and Beclin-1 in chronic abacterial prostatitis in rats. Methods 1) six male SD rats (about 300g) were selected and the prostate tissue was cut off completely under sterile condition. The tissue was shredded by scissors and put into the homogenate of glass homogenate. The homogenate was centrifuged at 12 000 r / min 4 鈩，

本文编号：1823357