VIP在前列腺癌PC-3、DU145细胞中增殖、血管生成及上皮—间充质转化的研究
本文选题：血管活性肠肽 + 前列腺癌 ； 参考：《青岛大学》2016年博士论文
【摘要】：目的通过细胞培养、动物实验等实验方法,利用CCK-8、PCR、Westernblot、Transwell小室等技术手段,探讨血管活性肠肽(VIP)在前列腺癌PC-3、DU145中增殖、血管生成、上皮-间充质转化的作用机制。方法用浓度分别为0、25、50、100μmol/L的VIP处理PC-3、DU145前列腺癌细胞,CCK-8法检测24、48、72h时PC-3细胞增殖能力的变化,PCR、Westernblot检测PC-3细胞Cyclin D1、bcl-2、MMP-9 m RNA和蛋白的表达;构建经100nmol/l VIP处理的裸鼠PC-3模型,测量移植瘤的体积和VEGF m RNA及微血管密度的变化;划痕实验和Transwell小室检测DU145细胞运动、迁移,PCR、Westernblot检测DU145细胞中上皮-间充质转化的指标E-cadherin、Vimentin、Snail m RNA和蛋白的变化。结果经不同浓度VIP处理的PC-3细胞的增殖活力具有显著差异,VIP的浓度越大,PC-3细胞的增殖活力越强,且具有时间差依赖性,异有统计学意义(P均0.05);随着VIP浓度的增大,Cyclin D1、bcl-2、MMP-9 m RNA及蛋白的表达增加,差异具有统计学意义(P0.05)。第8天及第15天经100nmol/l VIP处理的实验组PC-3裸鼠肿瘤中的体积、VEGFm RNA含量及MVD的数量要大于同期未经VIP处理的对照组,差异有统计学意义(P0.05)。随着VIP浓度的增大,划痕实验提示DU145运动能力增强,Transwell迁移、侵袭实验显示穿越小室的细胞个数也增多,E-cadherin m RNA和蛋白表达下降,Vimentin、Snail m RNA和蛋白表达增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论VIP通过CyclinD1促进细胞增殖、bcl-2减少细胞凋亡在激素非依赖性前列腺癌细胞的发生发展过程中起到促进肿瘤增生的作用;通过促使血管增生进而发挥其促使激素非依赖性前列腺癌细胞增殖的作用;通过促使细胞外基质的降解和上皮-间充质转化来促进激素非依赖性前列腺癌细胞扩散和转移的能力。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of angiogenesis, angiogenesis and epithelial-mesenchymal transformation in prostate cancer PC-3DU145 by means of cell culture and animal experiments. Methods PC-3DU145 prostate cancer cell line (PC-3DU145) was treated with VIP at the concentration of 0.25 渭 mol/L for 72 h. The proliferation of PC-3 cells was detected by Western blot. The expression of MMP-9 m RNA and protein in PC-3 cell line Cyclin D1bcl-2 was detected by Western blot, and the PC-3 model of nude mice treated with 100nmol/l VIP was established. The volume, VEGF m RNA and microvessel density of transplanted tumor were measured, and the movement of DU145 cells was detected by scratch test and Transwell chamber, and the changes of E-cadherin Vimentinnsnail RNA and protein in DU145 cells were detected by Western blot. Results the proliferative activity of PC-3 cells treated with different concentrations of VIP was significantly different. The larger the concentration of PC-3 was, the stronger the proliferative activity of PC-3 cells was, and the proliferation activity was time-dependent. With the increase of VIP concentration, the expression of MMP-9 m RNA and protein increased with the increase of VIP concentration, and the difference was statistically significant (P 0.05). On the 8th and 15th day, the volume of VEGFm RNA and the quantity of MVD in the PC-3 nude mice treated with 100nmol/l VIP were higher than those in the control group without VIP treatment at the same time, and the difference was statistically significant (P 0.05). With the increase of VIP concentration, the scratching test indicated that the mobility of DU145 increased and the number of cells passing through the cell increased, and the expression of E-cadherin m RNA and protein decreased. The difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion VIP can promote the proliferation of human prostate cancer cells through CyclinD1 and decrease the apoptosis of BCL 2 cells during the development of steroid-independent prostate cancer cells. The proliferation of steroid independent prostate cancer cells was induced by angiogenesis. By promoting the degradation of extracellular matrix and epithelial-mesenchymal transformation, the ability of hormone independent prostate cancer cell proliferation and metastasis is promoted.
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.25
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，本文编号：1877363
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