利拉鲁肽对胰岛素抵抗大鼠肾脏氧化应激的影响及相关机制的探讨

发布时间：2018-05-13 05:21

本文选题：利拉鲁肽 + 胰岛素抵抗　；参考：《承德医学院》2017年硕士论文

【摘要】：目的:研究氧化应激在高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)大鼠肾脏损害中的作用,并探讨IR状态下利拉鲁肽对肾脏的保护作用,为临床防治慢性肾脏疾病提供有效的途径。方法:SPF级雄性Wistar大鼠(n=54),4月龄(230-260g),随机分为正常对照组(n=16)与模型组(n=38),分别给予普通饮食和高脂饮食喂养。喂养8周末各组取5只行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,测定葡萄糖输注率(GIR),判定IR造模成功。将模型组大鼠随机分为IR组、干预组1、干预组2,干预组1和干预组2给予利拉鲁肽皮下注射,浓度分别为100μg/(kg·d)、200μg/(kg·d)。药物干预2周后,4组大鼠各取5只再行钳夹实验计算GIR;取肾组织于透射电镜下观察肾组织超微结构变化;分离血清检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),24h尿蛋白量,氧化应激指标相关指标(MDA、SOD、8-OHd G);并检测肾组织甘油二酯(DAG)及蛋白激酶C-β(PKC-β)、NADPH氧化酶P22phox、P47phox亚基基因及蛋白水平的表达情况。结果:1.高脂饮食诱导IR模型的建立第8周末,高脂饮食组GIR较正常对照组明显下降(20.4±3.6比30.2±2.5,P0.05),而FBG、FINS的表达均显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。2.四组大鼠一般情况的比较与对照组比较,IR组大鼠血清FBG、FINS、FFA、TC、TG及肾组织DAG表达增加(P0.05);与IR组比较,干预组1大鼠仅TG、FFA表达下降(P0.05),而干预组2大鼠上述指标均显著下降(P0.05);且干预组2大鼠FFA、DAG含量较干预组1明显减少,差异均有统计学意义(P0.05)。3.四组大鼠GIR的比较药物干预前:高脂组大鼠GIR较对照组明显下降(20.4±3.6比30.2±2.5,P0.05)。药物干预2周后,与对照组比较,IR组GIR明显下降(18.8±2.0比30.8±2.4,P0.05);与IR组比较,干预组2和干预组1大鼠GIR升高(25.8±1.4,21.6±2.5比18.8±2.0,P0.05);且干预组2较干预组1显著增加,差异有统计学意义(P0.05)。4.四组大鼠肾组织超微结构变化与对照组比较,IR组大鼠肾小球基底膜明显增厚,厚薄不均,部分足突肿胀、融合甚至缺失;而利拉鲁肽干预后,上述异常形态明显得到改善,但仍未恢复至正常状态。5.四组大鼠Scr、BUN、24h尿蛋白量比较与对照组比较,IR组Scr、BUN、24 h尿蛋白量明显升高(P0.05);与IR组比较,干预组1仅24h尿蛋白量减少(P0.05),而干预组2 Scr、BUN、24h尿蛋白量均显著降低(P0.05);且干预组2较干预组1 Scr、BUN、24h尿蛋白量进一步下降,差异有统计学意义(P0.05)。6.四组大鼠肾组织SOD、MDA、8-OHd G表达比较与对照组比较,IR组MDA含量有所升高,而SOD、8-OHd G表达明显下降(均P0.05);药物干预组大鼠MDA含量明显下降,而SOD、8-OHd G表达升高(均P0.05);且干预组2变化更为显著,差异均有统计学意义(P0.05)。7.利拉鲁肽对大鼠肾组织PKC-β、P22phox、P47phox基因表达水平的影响与对照组比较,IR组大鼠肾脏PKC-β、P22phox、P47phox mRNA表达水平明显增高(PKC-β:6.54±0.41比1.00±0.00;P22phox:4.89±0.38比1.00±0.00;P47phox:4.77±0.76比1.00±0.00;均P0.05);与IR组比较,利拉鲁肽干预组肾组织PKC-β、P22phox、P47phox mRNA表达水平下降,且高剂量组下降更明显,差异有统计学意义(PKC-β:2.35±0.51比5.82±0.60比6.54±0.41;P22phox:2.30±0.42比4.47±0.41比4.89±0.38;P47phox:2.21±0.30比3.63±0.44比4.67±0.76,均P0.05)。8.利拉鲁肽对大鼠肾组织PKC-β、p-PKC-β蛋白表达水平的影响与对照组比较,IR组PKC-β总蛋白水平变化不明显,差异无统计学意义(3.39±0.14比3.60±0.28,P0.05),而p-PKC-β蛋白表达增加(2.71±0.29比1.55±0.16,P0.05),计算出PKC-β磷酸化活性明显升高(0.80±0.10比0.43±0.11,P0.05);经利拉鲁肽干预后,可明显降低p-PKC-β表达,PKC-β磷酸化活性下降(p-PKC-β:1.91±0.10比2.32±1.19比2.71±0.29;PKC-β磷酸化活性:0.55±0.10比0.68±0.07比0.80±0.10,均P0.05),且干预组2较干预组1上述指标进一步降低,差异有统计学意义(P0.05)。9.利拉鲁肽对大鼠肾组织P22phox及P47phox蛋白相对表达量的影响IR组大鼠肾组织P22phox、P47phox蛋白表达水平较对照组明显增高(P22phox:2.72±0.20比1.27±0.24;P47phox:2.17±0.39比1.13±0.15,P0.05);与IR组比较,利拉鲁肽干预组肾组织P22phox、P47phox蛋白表达水平下降(P22phox:1.75±0.13比2.32±0.21比2.72±0.20;P47phox:1.30±0.18比1.66±0.15比2.17±0.39,P0.05);且高剂量组进一步降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.高脂饮食可导致大鼠产生IR;IR时发现已存在肾脏损害。2.利拉鲁肽可通过下调PKC-NADPH氧化酶通路,进而改善大鼠肾脏氧化应激,减轻IR导致的肾脏损害,进而发挥对肾脏的保护作用。
[Abstract]:Objective : To study the effect of oxidative stress on renal damage in rats with high fat diet induced by high fat diet , and to investigate the protective effect of liraglutide on renal function in rats with high fat diet . The results showed that : 1 . The rats were randomly divided into IR group , group 1 , total cholesterol ( TC ) , serum creatinine ( FFA ) , blood urea nitrogen ( BUN ) , total cholesterol ( TC ) , serum creatinine ( FFA ) , blood urea nitrogen ( BUN ) , 24h urinary protein content and protein level . Compared with control group , the expression of PKC - 尾 , P22phox and P47phox increased significantly in IR group ( P0.05 ) . The expression levels of PKC - 尾 and P47phox protein in renal tissue of rats were significantly higher than those in control group ( 3.39 卤 0.14 vs 3.60 卤 0.28 , P0.05 ) . thereby improving the kidney oxidative stress of the rat , reducing the renal damage caused by IR , and further exerting the protective effect on the kidney .

【学位授予单位】：承德医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R692

【参考文献】