DNA损伤修复相关基因多态性对精子DNA完整性和原发性男性不育的影响

发布时间：2018-10-13 17:16

【摘要】：目的探讨DNA损伤修复相关基因多态性（hOGG1rs1052133；MUTYHrs3219489，rs10527342；ERCC5rs17655；RNF8rs2269058，rs761737）与精子DNA完整性和原发性男性不育之间的关系，并分析基因-基因、基因-环境交互作用对原发性男性不育的影响，以期阐明原发性男性不育的遗传学病因。方法收集2011年8月至2012年12月在宁夏医科大学总医院生殖医学中心门诊确诊的原发性男性不育患者332例（其中原发性非梗阻性无精子症87例、原发性少弱精症166例、精液正常男性不育79例）作为病例组；收集同期在宁夏医科大学总医院体检，未借助辅助生殖技术、自然生育至少一个健康子女的生育男性329例为对照组。采集男性不育患者和对照组外周血2mL；采集男性不育患者和67例体检并有正常生育史的男性精液一份。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（Polymerase Chain Reaction-RestrictionFragment Length Polymorphism，PCR-RFLP）技术检测以上6个SNP的基因型，运用精子染色质扩散实验（Sperm Chromatin Dispersion Test, SCD）检测精子DNA完整性，，并以DNA断裂指数（DNAfragment index, DFI）表示。用t检验分析病例组和对照组中精子DFI的差异，方差分析检验原发性男性不育亚组和对照组精子DFI的差异以及病例组中6个SNP三种基因型携带者间精子DFI的差异，用卡方检验分析6个SNP基因型和等位基因频率在原发性男性不育组和对照组中的分布差异，用Logistic回归分析SNP与原发性男性不育的患病风险，用多因子降维法（MDR）分析基因-基因交互作用，采用单纯病例研究分析基因-环境（吸烟和饮酒）交互作用。结果1.原发性男性不育患者精子DFI（46.2±22.3%）显著高于对照组（21.4±9.2%）（P0.05）；在病例组中，少弱精症患者精子DFI（50.0±22.1%）和精液正常男性不育患者精子DFI（38.2±20.7%）均高于对照组（21.4±9.2）%（P0.05），并且少弱精症组精子DFI高于精液正常男性不育组精子DFI（P0.05）。 2. hOGG1rs1052133（C→G）三种基因型在原发性男性不育组和对照组中的频率分布差异有统计学意义（P0.05）；与CC型个体相比，携带CG、GG型的个体患原发性男性不育的风险降低（OR=0.54，95%CI=0.33-0.89；OR=0.55，95%CI=0.33-0.91）；其余5个SNP与原发性男性不育无相关性。 3.病例组中，6个SNP与精子DFI无相关性（P0.05）。 4.疾病亚组分层分析显示： 1）hOGG1基因rs1052133（C→G）与原发性少弱精症相关（P0.05），而与原发性无精症和精液正常男性不育无关（P0.05）。与CC基因型个体相比，携带CG、GG基因型的个体患原发性少弱精症的风险降低（OR=0.40，95%CI=0.22-0.70；OR=0.52，95%CI=0.29-0.92）； 2）RNF8基因rs761737（T→C）三种基因型在无精症组、少弱精症组、精液正常男性不育组和对照组中的频率分布差异无统计学意义（P0.05）。但在显性遗传模型下，精液正常男性不育组中，携带变异等位基因（CT+CC）个体的患病风险是TT型个体的0.52倍（P0.05，OR=0.52，95%CI：0.28-0.97）； 3）MUTYH基因rs3219489（G→C）三种基因型GG型、CG型和CC型，在精液正常男性不育组和对照组中的频率分布差异有统计学意义（P0.05）。与GG型个体相比，携带CG型和CC型个体患精液正常男性不育的风险降低（OR=0.56，95%CI：0.33-0.95；OR=0.32，95%CI：0.13-0.81），同时，在显性模型下，携带变异等位基因（CG+CC）个体的患病风险是GG型个体的0.50倍（P0.05，OR=0.50，95%CI：0.30-0.82）。G、C等位基因在两组中的频率分布差异也有统计学意义，携带C等位基因的个体患精液正常男性不育的风险是携带G等位基因个体的0.56倍（P0.05，OR=0.56，95%CI：0.38-0.82）。 5.基因-基因交互作用分析显示，DNA损伤修复相关的6个SNP间无交互作用。 6.基因-环境交互作用分析显示，RNF8基因rs2269058与吸烟存在相乘交互作用，其余5个SNP与吸烟、饮酒均不存在交互作用（P0.05）。结论1.原发性男性不育患者精子DNA完整性降低，所研究的DNA损伤修复基因的6个SNP可能对精子DNA完整性没有影响。 2. hOGG1基因rs1052133位点CG、GG基因型可能是原发性少弱精症的保护性因素；MUTYH基因rs3219489位点C等位基因可能是精液正常男性不育的保护性因素。 3.在显性遗传模型下，RNF8基因rs761737位点CT+CC基因型可能是精液正常男性不育的保护性因素。 4. ERCC5基因rs17655、MUTYH基因rs10527342和RNF8基因rs2269058与原发性男性不育可能无相关性。5.所研究的DNA损伤修复基因6个SNP间无交互作用；rs2269058-吸烟存在交互作用，但其可能不是通过影响精子DNA完整性来影响不育男性精子质量的。
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【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R698.2

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