CEP135表达与精子活力及精子DNA损伤的相关性研究

发布时间：2018-11-04 20:55

【摘要】：目的精子活力低下所导致的弱精症是男性不育的重要原因之一，深入探讨弱精症的发生机制、提出新的治疗策略是国内外生殖领域的一个研究热点。本实验旨在通过测定弱精症精子细胞的活力、DNA损伤率及中心小体蛋白135（centrosomalprotein135kDa，，CEP135）的相关表达量，并探讨CEP135表达与精子活力和精子DNA损伤率之间的相互关系，以确定CEP135在弱精症诊疗过程中的指导价值，并对其作用机制进行初步探讨。 方法应用计算机辅助精液分析对91例精液样本进行参数检测，按照WHO标准，根据（a+b）级精子百分率分为3组，Ⅰ组31例：（a+b）级精子＞50%或a级精子＞25%；Ⅱ组30例：（a+b）级精子25%~50%；Ⅲ组30例：（a+b）级精子＜25%。利用精子染色质扩散实验（Sperm chromatin dispersion test,SCD）检测各组精子细胞的DNA损伤率。逆转录-实时定量聚合酶链反应（Reversetranscription-quantitative real-time PCR， RT-qPCR）检测CEP135信使RNA（Messenger RNA，mRNA）在三组精液中的表达情况，采用2-ΔCT公式（ΔCT=CT目的-CT内参）计算目的基因的相对表达量（Relative expression，Re），琼脂糖凝胶电泳验证RT-qPCR的实验结果。应用SPSS16.0软件统计数据并对精子细胞的活力、DNA损伤率及CEP135mRNA的相对表达量进行相关性分析。 结果3组精液中精子细胞的活力分别为62.31%±7.97%、36.63%±6.61%、16.51%±6.57%，DNA损伤率分别为17.18%±6.72%、22.86%±6.67%、27.30%±6.44%，CEP135mRNA的平均相对表达量分别为9.45×10-2±2.64×10-4、9.48×10-2±3.24×10-4、9.49×10-2±2.52×10-4，各组之间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。DNA损伤率及CEP135mRNA的相对表达量均与精子细胞的活力呈显著负相关（r分别为-0.619，-0.574；P均＜0.01）；随着CEP135mRNA相对表达量的升高，DNA损伤率也逐渐增加，二者之间显著正相关（r=0.316；P＜0.01）。 结论弱精症精液中高表达的CEP135mRNA与精子细胞活力的降低及DNA损伤率的增高密切相关，具有显著相关性。临床上可以通过测定精子细胞CEP135mRNA的相对表达量来评估患者的精液质量，并通过基因干扰技术影响CEP135mRNA的相对表达量进而改善精液质量，提高弱精症的生育能力。
[Abstract]:Objective Aspermia caused by low sperm motility is one of the important causes of male infertility. It is a hot research topic in reproductive field at home and abroad to probe into the mechanism of spermatogenesis and put forward new treatment strategy. The aim of this study was to investigate the relationship between CEP135 expression and sperm motility and sperm DNA damage rate by measuring the activity of spermatozoa, the rate of DNA damage, and the expression of central body protein 135 (centrosomalprotein135kDa,CEP135) in asthenospermic spermatozoa. To determine the guiding value of CEP135 in the diagnosis and treatment of azoospermia and to explore its mechanism. Methods the parameters of 91 semen samples were measured by computer assisted semen analysis. According to the WHO standard, according to the percentage of (a b) grade sperm, 31 cases of group 鈪

本文编号：2311110