巨噬细胞胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响

发布时间：2018-11-25 08:45

【摘要】：目的探讨胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响。方法分离培养大鼠肾内巨噬细胞,构建巨噬细胞与肾小管上皮细胞共培养体系及缺糖缺氧(OGD)细胞模型,据处理不同将细胞分为OGD组、乙酰胆碱(ACh 100μmol/L)+OGD组和ACh+加兰他敏(Gal 10μmol/L)+OGD组。采用ELISA法检测各组上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达;MTT法检测肾小管细胞活力;RT-qPCR及Western blotting检测胆碱酯酶(AChE)m RNA和蛋白表达;比色法检测AChE活性。结果 ACh+OGD组TNF-α和IL-1β水平均低于OGD组,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平进一步下降;ACh+OGD组肾小管活力高于OGD组,加入Gal之后,肾小管活力进一步增强,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。3组之间巨噬细胞ACh E m RNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P0.05)。与OGD组比较,ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组肾小管细胞活力减弱,但ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组间差异无统计学意义(P=0.368)。结论 ACh和Gal可抑制肾脏巨噬细胞分泌炎性介质并抑制胆碱酯酶活性,减轻急性缺氧性肾小管细胞损伤。调控巨噬细胞的胆碱能通路可能是未来急性缺氧性肾损伤的治疗方向。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of cholinergic pathway on acute hypoglycemic renal tubular cell injury. Methods the rat renal macrophages were isolated and cultured. The co-culture system of macrophages and renal tubular epithelial cells and the model of hypoglycemic (OGD) cells were established. The cells were divided into OGD group according to different treatments. Acetylcholine (ACh 100 渭 mol/L) OGD group and ACh galanthamine (Gal 10 渭 mol/L) OGD group. The expression of tumor necrosis factor 伪 (TNF- 伪), interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and IL-10 in supernatant of each group was detected by ELISA assay, and the viability of renal tubular cells was detected by MTT assay. The expression of cholinesterase (AChE) m RNA and protein was detected by RT-qPCR and Western blotting, and the activity of AChE was detected by colorimetry. Results the levels of TNF- 伪 and IL-1 尾 in ACh OGD group were lower than those in OGD group. After adding Gal, TNF- 伪 and IL-1 尾 levels decreased further. The tubular activity in ACh OGD group was higher than that in OGD group, and the tubule activity was further enhanced after adding Gal. The difference was statistically significant (P0.05 or P0.01). There was no significant difference in the expression of ACh E m RNA and protein between the 3 groups (P0.05). Compared with OGD group, renal tubular cell activity in, ACh OGD group and ACh Gal OGD group was decreased, but there was no significant difference between ACh OGD group and ACh Gal OGD group (P < 0. 368). Conclusion ACh and Gal can inhibit the secretion of inflammatory mediators and the activity of cholinesterase in renal macrophages and alleviate acute hypoxic renal tubular cell injury. Regulating the cholinergic pathway of macrophages may be the therapeutic direction of acute hypoxic renal injury in the future.
【作者单位】： 深圳市第二人民医院重症医学科;深圳市第二人民医院介入治疗科;深圳市第二人民医院中心实验室;南昌大学第一附属医院重症医学科;
【基金】：国家自然科学基金(81101410) 广东省医学科学技术研究基金(A2016353) 广东省深圳市科技创新委项目(JCYJ20130401112313541;JCY20150330102401099;JCYJ20160425103130218) 深圳市第二人民医院临床-基础一对一桥梁项目基金(2015-16)~~
【分类号】：R692

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