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透明细胞肾细胞癌组织中DNMT3B异构体表达及其整体甲基化的分析

发布时间:2018-11-29 11:41
【摘要】:目的检测透明细胞肾细胞癌组织中DNA甲基转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)异构体表达及其整体甲基化的变化,探讨这些变化与透明细胞肾细胞癌的关系。方法选取15例透明细胞肾细胞癌及其癌旁组织,应用Real-time PCR技术检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3B六种主要异构体的mRNA表达,应用Western blot法检验DNMT3B4蛋白表达;应用联合亚硫酸氢钠的限制性内切酶分析法(COBRA)分析重复序列Alu和LINE-1的甲基化水平。结果透明细胞肾细胞癌组织中DNMT3B4 mRNA和蛋白表达水平比癌旁组织高;重复序列Alu和LINE-1的甲基化水平在透明细胞肾细胞癌组织中比癌旁组织低。结论 DNMT3B4表达增加可能与整体甲基化降低及透明细胞肾细胞癌的发生有密切关系。
[Abstract]:Objective to detect the expression of DNA methyltransferase 3B (DNA methyltransferase 3BnMT3B and its global methylation in clear cell renal cell carcinoma, and to explore the relationship between these changes and clear cell renal cell carcinoma. Methods in 15 cases of clear cell renal cell carcinoma and its adjacent tissues, the mRNA expression of six major isomers of DNMT1,DNMT3A,DNMT3B and DNMT3B was detected by Real-time PCR technique, and the expression of DNMT3B4 protein was detected by Western blot method. The methylation levels of repeated Alu and LINE-1 were analyzed by (COBRA) combined with sodium bisulfite restriction endonuclease analysis. Results the expression of DNMT3B4 mRNA and protein in clear cell renal cell carcinoma was higher than that in paracancerous tissue, and the methylation level of repeat sequence Alu and LINE-1 was lower in clear cell renal cell carcinoma than that in paracancerous tissue. Conclusion the increased expression of DNMT3B4 may be related to the decrease of global methylation and the occurrence of clear cell renal cell carcinoma.
【作者单位】: 内蒙古包头医学院生物医学研究中心;内蒙古包头医学院生物化学及分子生物学教研室;低氧适应转化医学北京市重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金(81160244、81360316、81460283、81550038、81660307) 内蒙古自然科学基金(2014MS0810) 包头医学院博士基金(BSJJ201623、BSJJ201617)
【分类号】:R737.11

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本文编号:2364900

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