结缔组织生长因子通过上调肾间质成纤维细胞组织型转谷氨酰胺酶和Ⅲ型胶原蛋白促进肾间质纤维化

发布时间：2019-01-30 15:43

【摘要】：目的观察结缔组织生长因子(CTGF)对肾间质成纤维细胞上组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和Ⅲ型胶原蛋白的影响,并探讨其相关的调控机制。方法以大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F细胞)为研究对象,给予CTGF刺激(不同剂量或不同时间),检测tTG的蛋白相对表达量和mRNA水平。观察CTGF对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的激活作用和不同信号通路阻断对CTGF调节tTG和Ⅲ型胶原蛋白作用的影响。结果以25、50、100、200 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量逐渐递增(P0.05),且均显著高于对照组(P值均0.05)。以100 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞6、12、24 h的tTG蛋白相对表达量逐渐递增(P0.05),刺激12、24、48 h时的tTG蛋白相对表达量均显著高于对照组(P值均0.05)。以100 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞6、12、24 h后tTG mRNA水平逐渐递增(P0.05),且均显著高于对照组(P值均0.05)。以100 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞5 rmin时ERK和Akt通路迅速磷酸化,刺激30 rmin后又恢复至基础水平。p38和c-Jun氨基末端激酶信号通路未检测到激活。单独以100.g/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量显著高于对照组(P0.05);以100ng/mL的CTGF和20μmol/L的LY294002,以及单独以20μmol/L的LY294002刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量与对照组的差异均无统计学意义(P值均0.05)。使用LY294002阻断P13K/Akt通路后,CTGF对tTG蛋白表达的诱导作用被抑制。单独以100 ng/mL的CTGF,以及100 ng/mL的CTGF和20μmol/L的PD98059刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量均显著高于对照组(P值均0.05);而单独以20μmol/L的PD98059刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量与对照组的差异无统计学意义(P0.05)。使用PD98059阻断ERK1/2 MAPK通路后,CTGF对tTG蛋白表达的诱导作用并未受到影响。单独以100 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞24 h后的细胞内Ⅲ型胶原蛋白和分泌的Ⅲ型胶原蛋白的相对表达量均显著高于对照组(P值均0.05);以100 ng/mL的CTGF和20μmol/L的LY294002刺激NRK-49F细胞24 h后的细胞内Ⅲ型胶原蛋白和分泌的Ⅲ型胶原蛋白的相对表达量均显著低于单独以100 ng/mL的CTGF刺激24 h后(P值均0.05);单独以20μmol/L的LY294002刺激NRK-49F细胞24 h后的细胞内Ⅲ型胶原蛋白和分泌的Ⅲ型胶原蛋白的相对表达量与对照组的差异均无统计学意义(P值均0.05)。使用LY294002阻断PI3K/Akt通路后,CIGF对Ⅲ型胶原蛋白表达的诱导作用也被抑制,但LY294002本身并不影响tTG的表达。结论 CTGF可以通过PI3K/Akt途径上调肾间质成纤维细胞中tTG和Ⅲ型胶原蛋白相对表达量,在肾间质纤维化中起重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of connective tissue growth factor (CTGF) on tissue transglutaminase (tTG) and collagen 鈪，

本文编号：2418281