沉默婆罗双树样基因4对前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡生物学行为的影响

发布时间：2019-10-09 01:43

【摘要】：目的:使用小干扰RNA(siRNA)抑制人前列腺癌LNCa P细胞中婆罗双树样基因4(SALL4)的表达并对抑制效果进行测定,检测沉默(SALL4)后LNCa P细胞增殖、集落形成及凋亡等生物学行为的变化。方法:培养LNCa P细胞,分为si-SALL4组、阴性对照组与空白对照组。Real-time PCR与Western blotting技术检测SALL4 mRNA与蛋白水平。采用MTS比色法观察各组细胞增殖能力的变化,采用集落形成实验观察各组细胞集落形成能力的变化,流式细胞术研究SALL4对细胞凋亡的影响,利用Western blotting方法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况。结果:与阴性对照组相比,si-SALL4组SALL4 mRNA和蛋白表达水平、细胞增殖能力、细胞集落形成能力均明显降低(P0.05),而凋亡细胞明显增加(P0.05),Bcl-2的表达减弱,而Bax的表达增强。结论:通过siRNA技术沉默(SALL4)表达可抑制前列腺癌LNCa P细胞增殖和集落形成能力,促进细胞凋亡,其促进凋亡作用可能与Bcl-2及Bax表达有关。
【图文】：

Figure4．DetectionofapoptoticratebyflowcytometryaftertransfectionofSALL4siＲNAinLNCaPcells．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vsnegativecontrol．图4流式细胞术检测转染SALL4siＲNA对细胞凋亡的影响6si-SALL4下调Bcl-2蛋白的表达，上调Bax蛋白的表达Westernblotting结果显示，与阴性对照组相比，si-SALL4组中LNCaP细胞的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达明显下调(P＜0.05)，而促凋亡蛋白Bax的表达量明显上调(P＜0.05)，见图5。讨论在欧美国家，前列腺癌是一种老年男性常见疾病，其发病率仅次于肺癌，居第2位。流行病学显示，前列腺癌在我国的发病率也呈逐年上升趋势，已列为男性泌尿系统肿瘤的第3位［9］，但发病机制尚不明确。研究表明，肿瘤不受控制的增殖能力与抵抗细胞凋亡能力是恶性肿瘤的两大标志之一［10］，但是调控肿瘤细胞增殖与抗凋亡功能的机制尚未明确。SALL4基因在维持胚胎器官的分化与发育中发挥着重要的作用，是一种重要的转录因子和干性因子。在人类中，，SALL4的缺失或突变与多种疾病相关，包括acro-renal-ocular综合征、Okihiro综合征和IVIC综合征，这些疾病均以多器官畸形为特征，如耳畸形、听力丧失以及肾脏、心脏和肢体等脏器的缺陷等。近年来研究表明SALL4蛋白在许多恶性肿瘤中高表达，其功能可能在调节肿瘤细胞特别是肿瘤干细胞的增殖与凋亡当中发挥着重要的作用。SALL4过表达于不同的恶性肿瘤，在结直肠癌中，大约90%的肿瘤标本有SALL4过表达，并且与肿瘤淋巴结转移及分化程度密切相关［11］，在乳腺癌中也有86.1%的肿瘤SALL4表达增高，甚至在肿瘤的早期就可以Figure5．TheeffectofSALL4siＲNAontheexpressionofBaxandBcl-2proteinsinLNCaPcells．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vsnegativecontrol

本文编号：2546537