转染tbx2 siRNA对人前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响

发布时间：2019-11-11 19:13

【摘要】：目的观察转染T-BOX转录因子2(tbx2)小干扰RNA(siRNA)对人非雄激素依赖性前列腺癌PC3细胞和雄激素依懒性前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法将体外培养的人前列腺癌PC3细胞随机分为观察组和对照组,通过Si Lent Fect TM Lipid Reagent技术分别转染tbx2 siRNA和阴性对照siRNA,继续培养48 h。采用Western blotting法检测两组细胞中tbx2蛋白相对表达量。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测两组细胞增殖活性(以OD_(450)表示)。采用Transwell迁移实验检测两组细胞迁移细胞数。采用Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭细胞数。采用Western blotting法检测两组细胞EMT相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维黏连蛋白(Fibronectin)及EMT相关上游转录因子Snail、Twist的表达。另取LNCaP细胞进行相同实验。结果转染48 h后观察组、对照组PC3细胞中tbx2相对表达量分别为0.345±0.016、0.723±0.031,LNCaP细胞中tbx2相对表达量分别为0.315±0.006、0.692±0.010。观察组PC3、LNCaP细胞中tbx2相对表达量均低于对照组(P均0.05)。将转染后的两种前列腺癌细胞继续培养24、48、72 h后,PC3细胞对照组OD_(450)值分别为0.487±0.026、0.868±0.031、1.387±0.107,观察组分别为0.315±0.022、0.550±0.027、0.765±0.046。LNCaP细胞对照组OD_(450)值分别为0.388±0.032、0.722±0.032、1.187±0.135,观察组分别为0.251±0.021、0.450±0.037、0.625±0.066。相同时间点观察组PC3、LNCaP细胞OD_(450)低于对照组(P均0.05)。观察组与对照组PC3细胞迁移细胞数分别为(118.67±6.11)、(292.33±5.03)个;LNCaP细胞迁移细胞数分别为(85.67±4.31)、(192.33±8.07)个。观察组PC3、LNCaP细胞迁移数目均低于对照组(P均0.05)。观察组,对照组PC3细胞侵袭细胞数分别为(89.00±3.02)、(186.33±5.84)个;LNCaP细胞侵袭细胞数分别为(81.67±3.42)、(232.33±7.42)个。观察组PC3、LNCaP细胞迁移数目均低于对照组(P均0.05)。观察组PC3、LNCaP细胞E-adherin表达高于对照组(P均0.05);N-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Snail、Twist相对表达量低于对照组(P均0.05)。结论转染tbx2 siRNA可以抑制细胞增殖,降低细胞迁移及侵袭能力,抑制细胞EMT过程。

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