YAP与2型糖尿病肾病及相关风险因素的研究

发布时间：2020-03-26 04:44

【摘要】：背景糖尿病肾病(Diabetes nephropathy,DN)作为2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)的主要的慢性微血管并发症之一,近年来在全球发病率显著升高,最新研究指出DN已成为终末期肾病(End-stage renal disease,ESRD)的首位病因。YAP(Yes-associated protein)作为Hippo通路中最主要的转录共激活因子,参与调控器官体积,细胞增殖、分化、凋亡,上皮-间质转分化和细胞接触性抑制等多种病理生理过程,近年来在糖尿病肾病中的作用受到重视,研究推测YAP作用于糖尿病肾病的进展过程。因此,明确DN状态下YAP通路的表达情况,对进一步明确DN的发病机制及诊疗思路提供新的理论依据。目的本文通过研究2型糖尿病肾病患者与正常人群肾组织中YAP通路表达情况,并评估2型糖尿病肾病YAP表达与临床指标的关系,旨在探讨YAP在2型糖尿病肾病中的表达及与临床指标之间的相关性,为延缓2型糖尿病肾病进展提供思路。方法收集2型糖尿病肾病肾穿刺病理标本51例,及肾肿瘤患者肾周正常肾组织10例,进行免疫组化实验,测定肾组织中YAP、TEAD(Tea domain)、结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)的表达部位及表达水平。收集上述2型糖尿病肾病组患者信息:性别,年龄,病程,收缩压,尿微量白蛋白(Urinary microalbuminuria,U-MA),尿蛋白(Urinary protein),尿白蛋白肌酐比值(Urinary protein creatinine ratio,UAcr),血清白蛋白(Serum albumin,SAlb),空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG),糖化血红蛋白(Glycated hemoglobin,GHbAlc),甘油三酯(Triglyceride,TG),总胆固醇(Total cholesterol,TC),低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-c),高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-c),尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN),血肌酐(Serum Creatinine,SCr),尿酸(Uric acid,UA),肾小球滤过率(Glomerular filtration rate,GFR),胱抑素C(Cystatin c,Cys-C)。根据糖尿病肾病分期标准对2型糖尿病肾病组进行分期。根据YAP、TEAD、CTGF染色程度及染色细胞百分率进行评分:不染色者0分,染色较淡者1分,染色较深计2分;染色细胞占计数细胞百分率≤ 5%者0分,6%～25%者1分,26%～50%者2分,≥ 51%者3分;以其染色程度和染色细胞百分率分数乘积结果为最终评分:0分者阴性,1～4分者弱阳性,4分者阳性。采用SPSS 22.0软件进行统计学比较与分析。结果1.正常肾组织中YAP主要表达于肾小球和肾小管细胞的细胞质中,少数细胞核中可见棕褐色颗粒,2型糖尿病肾病患者肾组织中YAP在肾小球和肾小管细胞的细胞核表达明显增加,两组YAP评分差异有统计学意义(P0.05)。2.正常肾组织中,TEAD主要表达于肾小球和肾小管细胞的细胞质中,而2型糖尿病肾病患者肾组织中TEAD在肾小球和肾小管细胞的细胞核中表达增加,两组TEAD评分差异有统计学意义(P0.05)。3.正常肾组织中,CTGF仅有少量表达于肾小球和肾小管细胞的细胞质和细胞核中,2型糖尿病肾病患者肾组织中CTGF在肾小球和肾小管细胞的细胞核的表达明显增加,两组CTGF评分差异有统计学意义(P0.05)。4.Spearman相关性分析示2型糖尿病肾病患者肾小球和肾小管细胞核中YAP表达与TEAD、CTGF表达均呈正相关,差异有统计学意义(P0.05)。5.根据正态性检验结果,采用单因素方差分析及非参数检验分析示DN各分期的U-MA、尿蛋白、UAcr、Alb、TG、TC、Cr、UA、GFR差异有统计学意义(P0.05)。6.Spearman相关性分析示YAP与收缩压、甘油三酯、总胆固醇、糖尿病肾病分期呈正相关,与血清白蛋白、肾小球滤过率呈负相关,差异有统计学意义(P0.05)。7.单因素分析显示YAP高表达组较YAP低表达组人群有较高的UAcr、Alb、Cr以及DN分期,且差异具有统计学意义(P0.05)。8.多因素Logistic回归分析示较高的DN分期和Cr与YAP高表达具有相关性(P0.05)。结论1.2型糖尿病肾病患者YAP、TEAD、CTGF表达均明显增加,细胞核中差异最显著,且YAP与TEAD、CTGF表达具有相关性,YAP高表达伴随TEAD、CTGF表达相应增加,YAP-TEAD-CTGF通路处于活跃状态。2.YAP表达与收缩压、尿素氮、肌酐、血清白蛋白具有相关性,控制收缩压,降低尿素氮、肌酐,升高血清白蛋白可能降低YAP高表达的风险。3.YAP表达与2型糖尿病肾病分期、肾小球滤过率具有相关性,YAP高表达可加重肾脏损害,提示抑制YAP活性可能具有延缓2型糖尿病肾病进展的作用。
【图文】：

比较图,肾病,比较图,尿蛋白

？逦曑邋Ａ（ｍｇ／Ｌ）逡逑图１０邋２型糖尿病肾病临床指标比较图１１邋２型糖尿病肾病临床指标比较逡逑１５Ｃ－．逡逑１000邋１逦？逦0邋ＤＮ邋３邋ｓｔａｇｅ逡逑Ｔ逦Ｅ３ＤＮ４＿逡逑嶀逦ＳｄＮｓＬＳ逦Ｔ邋Ｔ逦ＳＤＮＳｓｔ吻逡逑６００邋？逦＿逦丁逡逑４0°－邋W Ｍ－邋Ｔ邋＾逦１｜逡逑Ｈ．』＿＿邋■丨＿＿逡逑／邋／邋／逡逑ｃ／邋Ｚ逦，逡逑注：Ｐ＜０．０５；邋ＤＮＩＶ期邋ＶＳＤＮＩＩＩ期邋Ｕ－ＭＡ，尿蛋白，ＵＡｃｒ，邋Ａｌｂ，邋ＵＡ，邋Ｐ＜０．０５；逡逑ＤＮ邋Ｖ邋期与邋ＤＮＩＩＩ期邋Ａｌｂ，邋ＴＧ，邋ＴＣ，邋ｅＧＦＲ，邋Ｐ＜０．０５；邋ＤＮ邋Ｖ期与邋ＤＮ邋ＩＶ期邋ＴＧ，逡逑ＴＣ，邋ＵＡ，邋ｅＧＦＲ，邋Ｐ＜０．０５逡逑３６逡逑