低氧对大鼠肾小球内皮细胞糖萼的影响

发布时间：2020-09-02 16:27

　　 目的:研究低氧环境对大鼠肾小球内皮细胞糖萼的影响。方法:将66只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(西宁,2160m)6只、低氧组(5000m)及低氧+药物组(二甲基硫脲,DMTU)各30只。对照组于青海大学高原医学研究中心动物房内饲养。其余各组放入低压氧舱(氧浓度11%,海拔约5000m)建立低氧动物模型,并分别于6h、12h、24h、48h、72h留取大鼠尿液ELISA法检测尿微量白蛋白(Um Alb)、尿肌酐(Ucr);麻醉后抽取肾静脉血液TBA法检测丙二醛(MDA)的含量及WST-1法超氧化物歧化酶(SOD)的活力,并ELISA法检测血中内皮细胞糖萼成分Syndecan-1含量;摘取肾脏,取肾皮质组织,Western blot法检测肾小球内皮糖萼Syndecan-1、Glypican-1的含量;通过用硝酸镧标记的固定液灌注法在透射电镜下观察低氧环境下大鼠肾小球内皮糖萼的病理改变。结果:1.对大鼠进行低氧处理后,大鼠尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UmAlb/Ucr)从48小时开始升高,P0.05。抗氧化药物干预后,UmAlb/Ucr升高从48小时开始出现下降趋势,P0.05(图1)。2.大鼠血清SOD随低氧时间的延长,其活力逐渐下降,MDA逐渐升高,P0.05;抗氧化药物干预后SOD活力未见明显下降,MDA在低氧72小时未见到明显升高(图2、3);SOD与MDA呈负相关,P0.05(表5)。3.低氧环境下大鼠UmAlb/Ucr与SOD呈负相关,与MDA呈正相关,与血中Syndecan-1呈正相关,P0.05(表5)。4.与对照组比较,低氧组随低氧时间的延长血中Syndecan-1逐渐升高,P0.05;给予抗氧化干预后未见到逐渐升高的表现,P0.05(图4)。5.与对照组比较,低氧组肾皮质Syndecan-1在12小时有明显升高、P0.05,在24小时又开始下降,P0.05(表6);Glypican-1在24小时有明显升高、P0.05,在72小时又开始下降,P0.05(表7)。低氧给药组Syndecan-1与Glypican-1在各时间段没有统计学意义,但与低氧组比较,P0.05。6.病理结果:电镜下测量出低氧后糖萼层有逐渐变稀疏的趋势,P0.05;而给予低氧抗氧化药物干预后,糖萼层未发生明显改变(表8);各组观察的电镜切片中均未见到足突有明显融合、消失的病理改变,基底膜连续完整。结论:1.急性低氧环境下大鼠UmAlb/Ucr比值随着缺氧时间的延长逐渐增多,并且与氧化应激指标SOD、MDA呈明显相关性。表明低氧诱导氧化应激可以导致大鼠肾脏早期损伤。2.急性低氧环境下,血中GCX降解成分Syndecan-1逐渐增加,并且UmAlb/Ucr与其有明显相关性,说明循环Syndecan-1水平与UmAlb/Ucr水平一致,可共同作为急性低氧下内皮糖萼早期损伤的参考标志。经抗氧化干预后血中Syndecan-1水平被抑制,说明抗氧化应激可以预防内皮糖萼降解。3.血中Syndecan-1可以早期预测全身内皮糖萼损伤情况,而且抗氧化治疗对于保护内皮糖萼及降低尿蛋白治疗有效。4.急性低氧环境下,大鼠肾小球内皮糖萼成分Syndecan-1与Glypican-1变化趋势是内皮细胞对于急性低氧环境作出的反应,但随之可能出现修复或者再分布似乎也符合糖萼在调节内皮细胞适应机制方面的作用。5.急性低氧下大鼠尿微量白蛋白的形成机制可能主要是由于糖萼层的变化导致肾小球滤过膜电荷屏障改变所致。
【学位单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R692
【部分图文】：

UmAlb/Ucr 升高从 48 小时开始受到抑制，P<0.05。表 1 各组大鼠 UmAlb/Ucr 值 间低 氧 组 低 氧 药 物 组n=6 x±S n=6 x±Sh 171.3±5.24 171.3±5.24h 172.82±4.09 169.57±2.752h 175.4529±2.31 175.98±1.29244h 179.6273±5.69 180.54±1.45418h 240.6973±12.28＊# 196.3400±2.94△2h 282.7654±16.41＊# 227.5606±1.36△#F 120.019 14.395P 0.0001 0.0001＊表示与对照组(0h)比较 P＜0.05，△表示与同时间低氧组比较 P＜0.05，#表示与同组内其他时间段 P＜0.05。

药物干预后 SOD 活力未见明显下降。表 2 各组大鼠血浆 SOD 值（U/ml）时 间低 氧 组 低 氧 药 物 组n=6 x±S n=6 x±S0h 92.64±3.25 92.64±3.256h 85.91±2.81＊# 85.99±3.4412h 78.37±1.51＊# 85.97±1.76△24h 68.23±1.11＊# 76.32±2.11△#48h 57.44±1.46＊# 74.78±2.60△#72h 44.89±2.97＊# 69.73±1.19△#F 372.516 48.408P 0.0001 0.0001注：＊表示与对照组(0h)比较 P＜0.05，△表示与同时间低氧组比较 P＜0.05，#表示与同组内其他时间段比较 P＜0.05。

大鼠血清 MDA 水平随低氧时间逐渐升高，P <0.05。给予抗氧化药物干预后MDA 在低氧 72 小时未见到明显升高。表 3 各组大鼠血浆 MDA 值 （nmol/ml）时 间低 氧 组 低 氧 药 物 组n=6 x±S n=6 x±S0h 2.69±0.43 2.69±0.436h 3.07±0.99 3.11±0.6812h 3.16±0.42 3.52±0.8024h 3.35±1.06 3.37±0.5748h 3.97±0.78 3.96±0.5472h 4.59±1.34＊ 3.91±0.65△F 15.886 1.482P 0.001 0.245注：＊表示与对照组(0h)比较 P＜0.05，△表示与同时间低氧组比较 P＜0.05，

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本文编号：2810834