不明原因不育症患者精子超微结构的研究

发布时间：2017-04-03 20:07

  本文关键词：不明原因不育症患者精子超微结构的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:以不明原因不育症患者精液精子为研究材料,利用透射电镜观察其精子超微结构的畸变,探讨其超微结构的畸变与男性不育之间的关系,比较常规电镜包埋的材料与仅用戊二醛固定材料超微结构下头部空泡的的差异并分析其物质组成。方法:实验一:研究对象为结婚2年,女方生殖系统功能正常,原因不明不育症患者8例和结婚1年孕育有孩子的正常生育男性3例。研究对象在禁欲3-7天后,于室温自行按摩取精。待精液自动液化后,一部分缓慢注入离心管,以650g离心10min,弃去上层精浆,沉淀精子用琼脂糖进行预包埋,戊二醛固定1h后,PBS(pH=7.2)漂洗3次(10min/次),锇酸固定1h,然后用Epon812环氧树脂包埋,超薄切片用醋酸铀-柠檬酸铅双重染色,透射电子显微镜观察。主要观察精子的顶体、细胞核、线粒体和微管等超微结构改变。实验二:研究对象同实验一。利用透射电镜对8例不明原因不育症患者和3例正常生育男性精液精子常规处理的电镜材料与仅用戊二醛固定和醋酸铀染色处理的电镜材料进行对比研究,对精子头部空泡、细胞核、顶体等超微结构进行观察,分析精子头部空泡的物质组成。结果:1、透射电镜观察,正常精子的质膜和顶体膜结构完整清晰,精子核呈梨状,核染色质电子密度均匀一致,精子头部无或有少量空泡,尾部线粒体大小形态一致,排列规律,精子尾部微管9+2结构完好。2、不育患者精子头部形态异常、头部空泡多发,顶体超微结构产生畸变、尾部线粒体数减少或分布不均、轴丝9+2结构紊乱等。3、超微结构研究表明,不明原因不育患者精子畸形高于正常生育男性,精子头部空泡多发,空泡中含有脂类、蛋白质类及核酸类物质。结论:不明原因不育症患者精子存在顶体、精子核、线粒体、微管等超微结构改变,精子头部空泡增多等。其超微结构异常及过多的精子头部空泡可能是其不育原因之一,建议不明原因不育患者增加常规透射电镜精子检查项目,条件允许情况下可选择头部无或/少或/小空泡精子进行胞浆内形态学筛选精子注射(Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection,IMSI)辅助生殖技术。精子空泡中存在脂类、蛋白质类及核酸类物质,其来源有待进一步研究。
【关键词】：不明原因不育症 精子 头部空泡 超微结构
【学位授予单位】：河北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R698.2
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文缩略词表9-11
• 第1章 文献综述11-20
• 一 研究背景11-12
• 二 研究现状12-16
• 三 研究目的及意义16-17
• 参考文献17-20
• 第2章 实验研究20-36
• 实验一 不明原因不育症患者精子超微结构的研究20-27
• 一 实验材料20-21
• 二 实验方法和步骤21
• 三 结果21-24
• 四 讨论24-26
• 五 结论26-27
• 实验二 不明原因不育患者精子头部空泡超微结构研究27-33
• 一 实验材料27
• 二 实验方法和步骤27-28
• 三 结果28-31
• 四 讨论31-32
• 五 结论32-33
• 参考文献33-36
• 致谢36-37
• 攻读硕士学位期间取得的科研成果37

  本文关键词：不明原因不育症患者精子超微结构的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：284893