转化生长因子β1对肾小管上皮细胞C/EBPα及相关核转录因子表达的影响

发布时间：2020-12-15 07:01

　　目的观察转化生长因子β1（TGF-β1）对CCAAT增强子结合蛋白α（C/EBPα）、过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2）,利用TGF-β1分别在不同质量浓度（5和10 ng/m L）和不同时间点（0、4、12、24 h）刺激HK-2细胞,收集细胞总RNA和蛋白（核蛋白和总蛋白）以及细胞上清液。应用realtime PCR法和Western blotting检测C/EBPα和核转录因子PPARγ以及上皮细胞-间充质转化（EMT）相关蛋白α-SMA、E-cadherin的表达变化;ELISA方法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达水平。结果 TGF-β1（5 ng/m L）刺激HK-2细胞24 h后C/EBPα蛋白与PPARγ变化一致,差异均无统计学意义（P>0.05）;E-cadherin表达减少。TGF-β1（10 ng/m L）分别刺激0、4、12、24 h后,核蛋白中C/EBPα在12 h时表达明显降低,PPARγ在4 h表达... 

【文章来源】：上海交通大学学报(医学版). 2015年09期 北大核心

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【部分图文】：

TGF-β1(5ng/mL)刺激对HK-2总蛋白中E-cadherin、C/EBPα、α-SMA表达的影响

TGF-β1(10ng/mL)刺激对C/EBPα、PPAＲγ及E-cadherin

JOUＲNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVEＲSITYMEDICALSCIENCE|Vol．35No．9Sep．2015杜云蕾，等．转化生长因子β1对肾小管上皮细胞C/EBPα及相关核转录因子表达的影响24h后，ELISA法检测上清中MCP-1蛋白表达水平。结果显示:MCP-1在12、24h时分别升高6倍和10.67倍;4h与0h的表达量比较，差异无统计学意义(P＞0.05)(图4)。注:①P＜0.05与0h比较。图3TGF-β1(10ng/mL)对核蛋白C/EBPα、PPAＲγ表达的影响Fig3EffectofstimulationbyTGF-β1(10ng/mL)onexpressionsofnucleoproteinsC/EBPαandPPAＲγ注:①P＜0.05，②P＜0.01与0h比较。图4TGF-β1(10ng/mL)诱导后HK-2细胞培养上清液中的MCP-1蛋白表达Fig4ProteinexpressionofMCP-1insupernatantafterHK-2cellsbeinginducedbyTGF-β1(10ng/mL)3讨论慢性肾脏病(chronickidneydisease，CKD)进展为终末期肾脏病，主要是由于肾脏皮质结构的破坏即纤维化导致。间质的病变即纤维化又在肾脏纤维化过程中起着重要的作用［3］，其病变程度是预示CKD病情的重要指标［4］。间质纤维化的发生是一系列细胞和细胞因子共同参与的反应。其过程包括肾小管上皮细胞坏死、凋亡、功能的丧失、上皮细胞－间充质转化(epithelial-mesenchymaltransition，EMT)，以及间质大量炎症细胞的浸润及炎症反应的参与［3］。C/EBPs是一类锌指结构蛋白，都含有碱性亮氨酸拉链区［5］。首次以转录因子被发现，C/EBPα转录翻译为p42和p30两种蛋白质，根据在组织中的需要两种蛋白分别发挥作用［6］。在肝脏、肺脏尤其是脂肪组织中高表达［6］，在肝脏和肺脏肿瘤中可以通过抑制增殖促进分化，抑制肿瘤的进展［7］。C/EBPα在EMT中的作用机制，即对转分化的作用，研究较少。其在脂肪组织中


本文编号：2917863