肾纤康通过TGF-β1/Smads信号通路干预肾小管上皮细胞转分化的研究

发布时间：2020-12-23 06:04

　　目的:采用体外培养细胞的方法,观察中药复方肾纤康对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）刺激大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）转分化的作用,从细胞分子水平探讨肾纤康对肾间质纤维化的作用及其机制。方法:采用肾纤康及盐酸贝那普利片给大鼠灌胃,每天分灌2次,持续5天。5天后大鼠腹主动脉采血,分离血清,即得相应药物含药血清。体外培养NRK-52E细胞,培养基为含有10%胎牛血清的DMEM/High-glouse培养基。将NRK-52E细胞分为6组:正常对照组（A组,10%正常大鼠血清）、模型组（B组）、低剂量组（C组,2.5%肾纤康含药血清）、中剂量组（D组,5%肾纤康含药血清）、高剂量组（E组,10%肾纤康含药血清）、贝那普利组（F组,10%贝那普利含药血清）。后5组均用10ng/ml的TGF-β1诱导刺激,经药物干预细胞72h后,观察药物对NRK-52E细胞形态的影响,采用免疫荧光技术检测α-SMA、Smad3、Smad7蛋白的表达情况,Real-time PCR检测α-SMA、TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表达水平... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组NRK-52E细胞的形态变化（x200）

d 组 e 组 f 组图 1 各组 NRK-52E 细胞的形态变化（x200）Picture 1 Morphological changes of NRK-52E cells in every group（x200）表 2 各组 NRK-52E 细胞增殖的情况Table 2 Proliferation of NRK-52E cells in every group分组 OD 值（n=5， x±s） 细胞存活率（%）a 组 1.0926±0.0941 100b 组 1.1684±0.0679 * 106.94c 组 1.1426±0.0950 # 104.58d 组 1.0928±0.0535 # 100.02e 组 1.0862±0.0464 # 99.41f 组 1.1824±0.0436 # 108.22

2、肾纤康含药血清对 TGF-β1 诱导的 NRK-52E 细胞一般形态的影响正常的 NRK-52E 细胞（A 组）生长良好，各细胞之间连接紧密，排列成多边形或者卵圆形，像“铺路石”一样平铺在培养皿上；单纯TGF-β1 刺激 72h 后细胞（B 组）形态出现明显改变，大部分细胞失去其原有形态，拉长呈梭形，细胞之间排列欠紧密；肾纤康含药血清各剂量组（C 组、D 组、E 组）细胞形态发生变化，但变化程度均较B 组减轻，且随着剂量的增加，细胞形态变化逐渐接近于正常NRK-52E 细胞；F 组细胞很少部分呈梭形，大部分为仍为“铺路石”状，与 E 组细胞变化大致相同。见图 3。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2933202