SiRNA干扰内质网应激PERK/eIF2α通路在糖尿病肾病中的作用及机制研究

发布时间：2021-01-12 04:20

　　目的:PERK通过活化下游e IF2α和Nrf-2两条信号通路发挥促凋亡或抗凋亡效应,PERK内质网应激通路活化通过调节细胞凋亡参与多种疾病的发病。新近研究表明糖尿病肾病存在内质网应激及PERK/e IF2α通路活化,然而,PERK/e IF2α通路活化与肾组织细胞凋亡间的关系尚不明确。本研究在证明糖尿病肾组织存在GRP78/PERK/e IF2α内质网应激信号通路活化,以及组织细胞凋亡增加的前期工作基础上,拟采用RNA干扰技术下调e IF2α和Nrf-2基因表达,通过体外实验旨在明确:⑴糖尿病肾组织细胞凋亡与PERK/e IF2α和（或）PERK/Nrf-2信号通路活化的关系;⑵高糖和血管紧张素Ⅱ诱导肾小管上皮细胞凋亡,是否依赖PERK/e IF2α和（或）PERK/Nrf-2信号通路活化;⑶e IF2α和Nrf-2何为诱导凋亡的关键分子。本项目的意义在于为糖尿病肾病治疗筛选新的有效的分子干预靶点。方法:体外培养肾小管上皮细胞（NRK-52E）,分别单独转染e IF2α-si RNA、Nrf-2-si RNA慢病毒载体,用荧光显微镜观察转染效率,确定MOI值。转染后的NRK-52E细... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
常用缩略词中英文对照表
前言
1 实验材料与方法
    1.1 主要仪器
    1.2 主要试剂及耗材
    1.3 实验细胞
    1.4 实验方法
    1.5 统计学方法
2 结果
    2.1 荧光显微镜观察NRK-52E细胞感染效果
    2.2 荧光定量PCR（RT-PCR）筛选有效靶点
    2.3 流式细胞术结果
    2.4 Western blot分析
    2.5 免疫组化检测e IF2α、Nrf-2蛋白的表达
    2.6 TUNEL结果
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]葡萄糖调节蛋白78研究进展[J]. 吴逸园,杨业鹏,李载权.  生理科学进展. 2009(02)
[2]细胞因子与糖尿病肾病[J]. 王昱,鲍晓荣.  实用诊断与治疗杂志. 2007(11)
[3]接近正常的血糖对糖尿病微血管并发症的影响[J]. 丁鹤林.  国外医学(内科学分册). 1995(09)



本文编号：2972137