蝙蝠葛碱和miRNA-205-5p通过调控PI3K/Akt通路抑制肾细胞癌的实验研究

发布时间：2021-01-12 06:32

　　研究背景肾细胞癌（Renal cell carcinoma,RCC）是起源于肾小管上皮细胞的一种普遍的实体瘤。由于RCC对放化疗并不敏感,手术治疗仍是治疗RCC的唯一手段。因此,目前迫切需要寻找治疗RCC的新型策略。本研究的目的就是蝙蝠葛碱（一种双苄基异喹啉类生物碱）对RCC细胞的作用及其机制。研究方法我们用MTT实验检测蝙蝠葛碱对RCC细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA实验检测细胞凋亡,western blot实验检测蛋白表达情况。研究结果我们的研究发现蝙蝠葛碱可以有效抑制RCC细胞786-O、Caki-1、A-498和ACHN的活性。另外,蝙蝠葛碱诱导RCC细胞阻滞在G0/G1期。我们还发现蝙蝠葛碱处理RCC细胞后caspase-9和caspase-3表达改变,但是caspase-8活性表达没有变化,因此我们认为蝙蝠葛碱通过线粒体途径诱导RCC细胞凋亡。更重要的是,我们的研究结果表明蝙蝠葛碱的这一系列生物学作用都是通过抑制PI3K/Akt信号通路发挥作用。研究结论因此,我们认为蝙蝠葛碱通过PI3K/Akt信号通路抑制肾细胞癌细胞活力、诱导细胞G0/G1期阻滞和凋亡,... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同浓度蝙蝠葛碱处理对RCC细胞活力的影响

南京医科大学博士学位论文2 蝙蝠葛碱诱导细胞周期阻滞在 G0/G1 期为了更好的了解蝙蝠葛碱对 RCC 的作用，我们通过流式细胞仪检测了蝙蝠葛碱对RCC 细胞周期的影响。结果发现，蝙蝠葛碱诱导 Caki-1、A-498 和 786-O 细胞在 G0/G1期细胞数增加，在 S 期细胞数减少(Fig. 2 A)。另外，蝙蝠葛碱诱导细胞周期相关蛋白cyclinD1、CDK2 和 CDK4 表达的减少，诱导 p21 蛋白表达的增加(Fig. 2 B)。

- 21 -图 3. 蝙蝠葛碱通过内途径诱导 RCC 细胞凋亡0、5、10、15 和 20 μM 的蝙蝠葛碱分别处理 786-O、Caki-1 和 A-498 细胞 24 h。(A)用一个 nucleosome ELISA 试剂盒检测蝙蝠葛碱对 RCC 细胞凋亡的作用。(B) DEVD


本文编号：2972346