雌激素受体β干扰质粒对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响及ERK1/2信号通路的作用

发布时间：2021-02-08 04:27

　　目的探讨雌激素受体β（ERβ）干扰质粒对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响,以及ERK1/2信号通路在其中的作用。方法针对ERβ特定靶定位置,构建干扰质粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ（sh ERβ）,利用Lipofectemine2000作为载体将sh ERβ转染PC3细胞,采用G418筛选稳定低表达ERβ的PC3细胞。Real-time PCR及Western blot检测ERβ的表达。实验分为空白对照组、阴性对照组、sh ERβ组,将3组细胞注射在裸鼠皮下建立移植瘤模型,空白对照组未加入任何处理因素;阴性对照组转染空质粒psilencer-2.1-U6-neo;sh ERβ组转染重组质粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ。绘制肿瘤生长曲线和称取瘤重;应用免疫组织化学检测肿瘤组织ERβ的表达及ERK1/2活化;应用Western blot检测肿瘤组织VEGF的表达。结果测序比对分析表明成功完成了干扰质粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ的构建,Real-time PCR及Western blot结果显示成功转染并筛选出... 

【文章来源】：广东医学. 2017,38(18)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ质粒构建
        1.2.2 细胞培养及转染
        1.2.3 ERβ的表达
        1.2.4 实验分组
        1.2.5 建立裸鼠移植瘤模型
        1.2.6 肿瘤组织切片免疫组化检测
        1.2.7 肿瘤组织Western blot检测
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 干扰质粒构建和细胞转染
        2.1.1 psilencer-2. 1-U6-neo-sh ERβ的测序
        2.1.2 ERβ的表达
    2.2 体内致瘤能力
    2.3 移植瘤组织ERβ蛋白表达和ERK1/2蛋白活化
    2.4 移植瘤组织VEGF蛋白表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的药物治疗新进展[J]. 刘兆博,王春喜.  中国老年学杂志. 2015(09)
[2]多种肿瘤标志物联合前列腺特异性抗原检测在前列腺癌诊断中的价值[J]. 谢冲,黄其伟,王国民,唐群业,郭剑明.  中华泌尿外科杂志. 2015 (03)
[3]前列腺癌患者血清微小RNA表达谱的初步研究[J]. 丁翔,崔凤梅,侯建全,欧阳骏,浦金贤,李纲,吕金星,黄玉华,徐晓峰,严春寅.  中华泌尿外科杂志. 2015 (03)
[4]前列腺癌发病机制中雄激素和雄激素受体信号的作用[J]. 鲍文华,陈福军,杨泽.  中国老年保健医学. 2015(01)
[5]肿瘤发病及治疗中ER的作用[J]. 张翠翠,陈梦云,轩菡,张博.  现代肿瘤医学. 2014(10)
[6]雌激素受体在前列腺癌中的表达分布及预后意义[J]. 刘余庆,卢剑,陆敏,马然,洪锴,黄毅,马潞林.  中华泌尿外科杂志. 2013 (05)



本文编号：3023365